SDS-Polyacrylamide Gel Electrophoreses (PAGE)

소개

SDS-Polyacrylamide Gel Electrophoreses (PAGE)

목차

SDS-Polyacrylamide Gel Electrophoreses (PAGE)
Ⅰ. Introduction
1.1. 이론
1.2. 목적

Ⅱ. Materials and Methods

Ⅲ. Results

Ⅳ. Discussion

본문내용

Ⅰ. Introduction
1.1. 이론
SDS-polyacrylamide gel electrophoresis(SDS-PAGE)는 단백질 정제과정동안 샘플들의
순도의 분석뿐만 아니라 단백질의 molecular weight를 측정하는데 기본적인 방법이다.
이것의 장점은 단백질들이 분리됨과 동시에 시각화 할 수 있어서 연구자들이 분리된 단백 질의 숫자를 빨리 측정할 수 있도록 해준다.
전기장에서, 분자의 전기적 이동도(μ)는 분자의 질량에 대한 전하의 비이다.
μ= charge / mass
게다가 분자의 전기적 이동도(μ)는 마찰계수(f)에 대한 분자의 net charge(Z)의 비이다.
μ= Z / f
단백질의 전기영동은 보통 cross-linked polymer polyacrylamide로 만들어진 겔에서
수행된다. polyacrylamide gel은 대략적으로 단백질의 질량 또는 분자량에 대한 비를
이용하여 단백질들의 이동을 천천히 함으로서‘분자의 체’같은 역할을 수행한다. 그러나
detergent sodium dodecylsulfate(SDS)와 β-mercaptoethanol과 같은 reducing agent
를 사용함으로서 전기영동 시스템은 단백질의 intrinsic charge와 상관없이 그것의 분자 량과 관련해서 단백질의 전기영동적인 이동성과 관련되어 진다. reducing agent는 이황 화결합의 interchain과 intrachain을 깨는 역할을 수행하고, SDS는 단백질들을 덫에 걸리 게 하는 micelle을 형성해서 단백질에 단단히 붙는다. SDS에 의한 강한 negative charge
는 protein에 결합하여 protein의 intrinsic charge를 제거한다. SDS는 아주 일정하게 1.4g
SDS/g protein의 값으로 대부분의 단백질에 붙는다. 그러므로 SDS micelles에 있는
대부분의 단백질은 전하 대 질량비가 매우 유사하다.

참고자료

· 없음