Gel Filtration을 이용한 molecular weight 결정

소개

이제야 올리네요.
시간이 조금 지난 보고서라 매우 유용하게 사용될 것입니다.
생화학 보고서로 A+ 이었고 discussion부분 특히 잘 참고하시고
그대로 쓰지 마시고 조금씩 바꿔서 자기의 생각을 써주심 더 좋겠죠?!^^
그럼 좋은 보고서 점수 받으세요.

목차

1. 실험제목
2. 실험날짜
3. 제출자 및 공동실험자
4. 실험목적
5. 실험원리
6. 시약 및 기자재
7. 실험방법
8. 결과
9. 고찰
10. 참고문헌
11. Further study

본문내용

9. 고찰
☞ 이번 실험은 서로 다른 molecular weight를 가진 protein sample을 gel filtration chromatography가 molecular weight이 큰 단백질은 gel colume을 빨리 통과하고 molecular weight이 작은 단백질은 gel colume에 오랫동안 머물러 있는 것을 이용하여 분리한 후 이것들의 정보를 가지고 미지시료의 molecular weight을 예상하는 실험이였다.
Sample에는 4가지 protein이 들어 있었는데 그 중 blue dextran은 void volume을 측정하기 위해 사용했다. 그 이유는 blue dextran의 경우 2000KDa이기 때문에 bead안으로 들어가지 못하고 그대로 colume을 통과하기 때문이다.(11. 문제 3. 참고) 실험 도중 blue dextran(blue)과 aprotinin(red)가 내려오는 속도를 비교해보면 쉽게 알 수 있다.
Sample은 molecular weight이 무거운 순서대로 빠져나오게 되는데 그 순서를 보면 blue dextran - BSA - cytochrome c - aprotinin의 순서이다. 이렇게 나온 protein은 흡광도를 재서 어느 fraction에서 sample protein이 나왔는지 예상할 수 있다. 즉 그림 1.에서 보는 것과 같이 protein이 들어있는 fraction에서 흡광도 수치가 올라가는 것을 볼 수 있는데 이 값을 읽으면 sample protein의 elution volume을 알 수 있다. 예를 들어 우리 조의 경우 aprotinin이 19번 fraction에서 나왔는데 19×400μl=7600μl의

참고자료

· 1) 한국생화학회 (1999) 실험생화학, 탐구당, 서울
· 2) 생화학실험(1) 전반기 (2004)
· 3) Biochemistry, Stryer 외, Freeman