[유전학] Mammalian karyotype analysis

소개

유전학 실험 레포트
Mammalian karyotype analysis

목차

1. 포유동물의 핵형분석

2. 염색체 표본 제작의 기본

3. 표본 제작 방법

4. 사람의 핵형

5. 핵형분석에 의한 염색체 이상의 표기방법 ; 염색체의 구조와 명명법

6. 염색체 이상

본문내용

1. 포유동물의 핵형분석
생물의 염색체를 관찰하는 방법에는 여러 가지가 있으나 크게 나누어 배양법을 이용한 염색체 표본 작성법과 생체의 표본 작성법 2가지가 있다. 그리고 염색체 표본을 염색하는 데도 보통 염색법과 띠 염색법 2 종류가 있다.
생쥐나 쥐, colchicine, 주사기(1~5ml)와 주사바늘, KCl, 가위, 윈심관(5~10ml용), 원심분리기, 메탄올과 빙초산, 현미경, 슬라이드 글라스와 커버글라스, 알코올램프, 파스퇴르피펫, 염기성색소, 현미경 사진기를 준비한다.
생쥐나 쥐가 준비되었으면 0.05%의 colchicine 용액을 동물의 복강에 주사하여 1~2시간 방치한다. 이 때 생쥐인 경우는 1ml 정도의 colchicine 용액을 주사하고, 쥐의 경우에는 3·5ml정도 주사한다. 주사 후 1~2시간이 지나면 생쥐의 목 부분을 누르고 꼬리를 뒤로 잡아끌면 척추 목의 척수가 끊어져 생쥐는 곧 죽게 되는데 이 방법이 불편하면 에테르나 기타의 방법으로 죽여도 된다. 생쥐가 죽으면 대퇴부만을 절단하여 근육이나 기타의 부분을 제거한 다음 미리 준비한 원심관에 넣고 37℃로 가온한 0.75% KCl 용액 2~3ml를 가한 후 주사기를 이용, 골수를 씻어낸다. 골수를 씻은 다음 대퇴골을 제거하고 골수가 용액에 균일하게 흩어지지 않았으면 파스퇴르피펫을 이용하여 흩어지게 한 후 5~7분간 37℃에서 방치한다. 다음은 원심분리기에 옮겨놓고 600rpm에서 5분간 원심분리하여 상등액을 파스퇴르피펫을 이용하여 완전히 제거한 후, 고정액(메탄올 3 : 빙초산 1의 용액)을 원심관 밑에 가라앉은 골수세포가 흩어지지 않도록 주의하면서 아주 서서히 1~2ml 가하여 30분간 고정한다. 고정이 끝나면 다시 파스퇴르피펫을 이용하여 골수세포가 고정액 속에 균일하게 흩어지게 한 후, 600rpm에서 5분간 원심분리하여 고정액을 버리고 가라앉은 세포의 양에 따라 1~2ml의 새로운 고정액을 가하여 파스퇴르피펫을 이용해 세포들이 균일하게 흩어지게 한 후, 다시 600rpm에서 5분간 원심 분리하여 고정액을 버리고 새로운 고정액을 세포량에 따라 적당량, 즉 생쥐인 경우 1ml정도, 쥐인 경우는 5~7ml정도 가하여 세포들이 균일하게 고정액에 흩어지게 한 후 염색체 표본을 작성한다.

참고자료

· 1. 한국유전학회 / 유전학실험 / 아카데미서적 / 1994 / pp147~150
· 2. 김영설 / 유전자 진단의 이론과 실제 / 한의학 / 1999 / p115
· 3. Rovert F. weaver / 분자생물학 / 라이프사이언스 / 2000 / pp165~166
· 4. D. Peter Snustad / 최신유전학 / 범한서적 / 2002 / pp156~158