[분리정제]TLC를 이용한 아미노산의 정성분석

소개

전개용매에 의해 분리하여 표준물질과 비교분석하는 TLC실험보고서.
TLC에 관한 전반적인 내용과 함께 크로마토크래피에대한 설명 다룸.

목차

1.Theme
2.Name & Coworkers
3.Date
4,목적
5.내용
1) 아미노산
2)크로마토그래피
-혼합물분리
-크로마토그래피 장점
-크로마토그래피 원리
-크로마토그래피 분류
3)TLC
-TLC 원리
-TLC 방법
4)Ninhydrin반응

본문내용

Ninhydrin 반응

- 이 반응 α-아미노기를 가진 화합물이 나타내는 정색반응
- α-아미노산, peptide, 단백질뿐만 아니라 amine류, 또는 암모니아들도 이반응에 양성으 로 나타낸다.
- 반응은 매우 예민하기 때문에 아미노산 및 단백질의 확인에 널리 이용될 뿐만 아니라, 이 들의 정량에도 이용된다.
- 아미노산과 닌하이드린을 가열 반응시키면 나타낸 것처럼 아미노산의 산화분해가 일어난 환원된 닌하이드린과 암모니아, 이산화탄소, aldehyde가 생성되며 다음에 환원된 닌하이드린과 암모니아, 닌하이드린이 반응하여 Ruhemann`s purple이라는 청자색의 색소가 생성한다.
- 아미노산에서의 발색은 보통 자색이지만 histidine, glycine에서는 적회색, phenylalanine, tyrosine, aspartate는 청색, proline은 황색으로 발색된다.
- 이 발색은 예민하여 50~100만분의 1정도의 감도를 나타내므로, 아미노산의 검출에 이용된다.
- 아미노산을 종이크로마토그래피 등으로 전개하고, 0.3% 닌히드린의 부틸알코올용액을 분무하여 전아미노산을 검출 확인하는 방법이 흔히 쓰인다. 또, 비색정량에 이용된다.

6. Reagent & Equipment
Reagent: Amino acid standard sample, Development solution(Acetone: chloroform:
acetic acid: H2O = 40:40:20:10), 발색시약(1% ninhydrin의 acetone: EtOH= 1:1용액)
Equipment: Development vessel, silica gel plate, capillary, Dry oven, Spray

7. Method

① sample preparation(시료 조제): 아미노산 함유 시료를 준비했다. 발색시약(ninhydrin
solution)을 제조하였다.

참고자료

· 유기화학실험/화학교재편찬위원회/청문각
· 기초유기화학실험/심성봉 외 3명/자유아카데미
· 단위조작/고완석외4명/보문당
· 유기화학실험/김정균저/청문각
· 유기화학실험/박원규저/형설출판사