실험이론 - 배지제조, DNA ligation, competent cell, transformation, SDS-PAGE

소개

유전자조작실험의 기본이 되는 실험의 이론들입니다.
기본 원리, 이론, 실험 재료 및 방법 등이 잘 정리되어있습니다.
실험수업을 들으시는 분들은 한학기 이상 실함하시는 동안 두고두고 참고가 될 것입니다.

◈ 배지의 종류와 제조방법
◈ DNA ligation
◈ competent cell
◈ transformation
◈ SDS - PAGE

목차

◈ 배지의 종류와 제조방법

◈ DNA ligation

◈ competent cell

◈ transformation

◈ SDS - PAGE

본문내용

◈ 배지의 종류와 제조방법

◎ 원 리
생물이나 동식물의 조직을 분리하고 배양하기 위하여 배양체가 필요로 하는 영양물질을 주성분으로 하고, 다시 특수한 목적을 위한 물질을 넣어 혼합한 것이다, 즉, 미생물의 종류 및 사용 목적에 맞는 배지가 필요하다. 배지는 기체상으로 얻어지는 것을 제외한 생존 발육에 발가결한 물을 비롯하여 영양물질로서 탄소원, 질소원, 무기염류, 발육인자(비타민류)등을 공급해주는 역할을 한다. 미생물은 종류에 따라 영양 요구성이 다르며, 배지에 따라 대상으로 하는 미생물의 생육에 필요한 영양소를 적당량 가지고 있어야 하며, pH와 물리성이 맞아야 하고 무균적 이어야 한다.

◎ 이 론
1. 주요 성분 : 탄소원, 질소원, 무기염류, 생장소
→ 미생물 중에는 탄소원으로 탄산가스, 질소원으로 공기 중의 질소를 이용할 수 있는 것이 있으나, 일반적으로 탄소원은 당류, 유기산에서, 질소원으로는 무기, 유기 질소화합물을 요구함과 동시에 각종 무기염류를 필요로 한다. 그 외에 일부 미생물은 비타민이나 미량의 요소를 필요로 한다.


1) 탄소원
- 대부분 glucose와 sucrose를 가장 많이 사용한다. 미생물의 종류, 목적에 따라 fructose, maltose, lactose, 전분 등의 당류와 사과산, 구연산, 주석산 등의 유기산 및 분자량이 작은 지방산 등이 사용된다.

2) 질소원
- 질소원은 단백질 합성에 이용된다. 미생물은 암모니움염이나 잘산염 등의 무기태 질소를 이용할 수 있으나, 미생물의 종류에 따라 아미노산이나 peptone 등의 유기태 질소를 요구하는 것도 있다.

3) 무기염류
- 무기염은 균체의 구성성분으로 이용되기도 하고, 배지의 pH, 삼투압의 조절에도 중요한 작용을 한다. 병원균의 배양에 필요한 주요 무기염은 P, Na, K, Mg, S, Fe, Cl이며, Ca, Mn, Zn, Cu 등을 필요로 하는 것도 있다.

참고자료

· 없음