Osmotic Fragility Test (적혈구 취약성 검사)

소개

동물생리학 적혈구 취약성 검사

목차

Osmotic Fragility Test
1. 검사명 : Osmotic Fragility Test(적혈구 취약성 검사)
2. 검사원리 :
3. 검체 채취 용기
4. 검체 적합성 판정 기준
5. 시약
7. 장비
8. 검사방법

본문내용

1. 검사명 : Osmotic Fragility Test(적혈구 취약성 검사)
2. 검사원리 :
적혈구막은 반투과막으로 되어 있어 저장 식염수에 넣으면 수분이 적혈구내로 침투하여 spherocyte가 되고 일정한 용적이 넘으면 적혈구막이 파괴되어 용혈된다.
0.25%부터 0.59%까지 0.02% 간격으로 식염수액을 만들고 정맥혈 20ul씩 가하여 2 시간 후의 용 혈 정도를 관찰한다.
3. 검체 채취 용기 : Heparin 튜브
4. 검체 적합성 판정 기준
1) 1000 unit heparin 0.1ml에 혈액 10ml를 잘 혼합한다.
2) Autoincubated blood(24 시간/ 37℃) : 반드시 무균 상태이어야 용혈을 방지할 수 있다.
5. 시약
1) 0.9% 생리 식염수 2) 증류수
6. 정도 관리 물질 : 혈액형은 관계없으나 환자와 혈연관계가 없는 정상인을 대조군으로 함께 검사한다.
7. 장비
1) 시험관(5ml)
2) Pipette(10ml pipette & micropipette)
3) Spectrophotometer
8. 검사방법
A. 2 시간 적혈구 취약성 검사
(1) 0.25%에서 0.59%까지 0.02% 농도별로 시험관을 20개 세운다.
(2) 환자와 대조군의 검체를 아래의 Table과 같은 방법으로 조작한다.
(3) 환자와 정상인 대조의 농축 적혈구를 20ul씩 넣고 vortex를 사용하지 않고 손가락으로 튜브의 밑 을 쳐서 부드럽게 혼합한다.
(4) 실온에 2 시간 방치 후 상층액이 분홍빛으로 용혈이 나타나는 농도를 관찰한다.
(5) 그 후 2000rpm으로 5 분 원심분리한다.
(6) 그 상층액을 540nm에서 No.21(saline)를 blank로하여 흡광도를 측정한다.
9. 결과 및 보고방법
1) 육안 관찰 : 분홍색으로 용혈이 나타나기 시작하는 농도가 시작점이고 시험관 밑에 적혈구가 없는 농도가 완전 용혈이 이루어지는 종말점이다.
2) % Hemolysis (원심분리후 측정)
(ODｓ-ODB) ODｓ: 상층액의 OD값

참고자료

· 1) Simons A : Hematology, A Combined Theoretical and Technical Approach, 2nd ed., Butterworth-Heinemann, Boston, Oxford, 1997, pp. 283-286
· 2) Howazet JH & Hoawzet PJ : Laboratory Medicine, Test Selection and Interpretation, Churchill Livingstone, New York, Edinburgh, 1991, pp. 480-481