[생물]DNA Fingerprinting and DNA Sequencing

소개

DNA Fingerprinting 과 DNA Sequencing 에 관한 실험 전 사전 조사 레포트 입니다.
각 실험의 다양한 방법과 방법의 실험과정을 그림과 도식을 사용하여 작성하였습니다.(편집과정마침)

목차

1. DNA Fingerprinting
① RELP
② VNTR
③ Etc.. (PCR을 이용하지 않는 방법)
2. DNA Sequencing

본문내용

1. DNA Fingerprinting
① RELP
(1) 샘플 DNA를 추출하여 통째로 사용한다.
(2) 기존에 마커로 알려져 있는 primer 또는 random primer를 이용하여 PCR한다.
(3) 원본 DNA가 달라서 primer 부착부위가 달라지면 증폭된 DNA 염기부위의 길이가 달라지는데, 여전히 PCR된 산물이 섞여서 분리가 되어있지 않다.
(4) Agarose(DNAse free)를 TAE buffer라는 완충용액에 적절한 농도를 혼입하여 열을 가했다가 식히면서 정형의 틀을 만들어 굳힌 후, TAE buffer tank에 넣어 둔다. - 이때 미세하고 균일한 spore을 갖는 겔이 만들어지게 됩니다.
(5) PCR 산물에 염색액 등(조성 생략)을 넣은 후, micropipette으로 적당량씩 gel에 만들어진 구멍에 각각 덜어 넣는다.(과학 뉴스에서 이 장면을 자주 보신 듯)
(6) 전기영동장치에 전기를 흘리면 +,- 극성을 갖는 DNA 혼입액이 DNA의 길이차이에 따라 운동속도에 차이가 생겨 +쪽에서 -쪽으로 이동하게 된다.(등전이점 개념 생략)
(7) 적당한 시간 후 전기를 끄고, DNA를 EtBr(에씨듐 브로마이드)로 염색한 후 UV에서 관찰하면, DNA가 짧은 bar의 형태로 분포하게 되는데, 이들의 차이를 가지고 다형성을 검토하게 된다.

참고자료

· 일반생물학, 일반생물학 실험, 인터넷