[자연과학]생물학 실험 - 포도당의 정량<혈당량측정> (Quantatitave analysis of glucose)

소개

생물학실험-포도당정량(혈당량측정)입니다. ^-^ 저는 생물학실험 레포트를 판매하고 있구요

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1 식물세포의 관찰 2 동물세포의 관찰 3 미생물의 관찰 4 완충용액의 제조 5 포도당의 정량
6 단백질의 정량 7 생물학적 수질검사(대장균검출) 8 항생제의 활성 관찰 9 E.Coli 형질전환
개별레포트 : 여러가지 단백질 정량의 방법 (Brodford, Lowry, 분광학적검사, 뷰렛 등..)

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목차

1 Object
2 Introduction
3 Material and Apparatus
4 Method
5 Results
6 Discussion
▹spectrophotometer의 원리와 사용방법
▹표준용액 곡선의 원리와 사용방법
▹혈당량 측정법의 종류와 우리가 한 측정법 - GOD법
▹실험에서의 실수
▹실험 고찰 - 오차 발생에 관하여
7 Reference

본문내용

1 손을 깨끗이 세척한 후, 란셋을 이용하여 체혈한다.
2 각 tube에 0.3ml(300μl) 의 효소 용액을 담는다.
3 효소 용액이 담긴 tube 중 첫 번째에는 증류수를, 두 번째에는 표준 용액을, 세 번째에는
채혈한 혈액 sample 2μl 씩 넣는다.
4 tube의 용액을 잘 섞은 후 37℃에서 5분동안 반응 시킨다.
5 각 반응액을 증류수를 이용하여 5배 희석하고 파장 505 nm에서 흡광도를 측정한다.
6 표준용액의 흡광도를 이용하여 표준 직선 그래프를 작성한다.
7 혈액 sample의 포도당 농도를 각각 표준 직선 그래프와 계산식을 이용하여 확인한다.
혈당량 측정 방법은 환원법, 축합법, 효소법 세가지로 나눌 수 있다.
그 중 효소법은 매우 민갑한 반응법이며, 우리는 효소법 중 GOD 법을 사용하였다.
전체 반응식은 다음과 같다

Mutarotase

α-D-Glocose β-D-Glocose

GOD

β-D-Glocose + O2 + H20 Gluconic acid + H2O2

POD

H2O2 + 4-AAP + Phenol Quinoneimine + 2H20


▹효소법에서는 환원당이나 진당등을 제단백 해줄 필요가 없다.
▹GOD법에서는 교질보호제로 gum gatti를 사용한다. 이는 고체가 되는 것을 막는 성질을 가지고 있다.
▹Mutarotase는 α-D-Glocos를 β-D-Glocose로 전환시키는 변성광 효소이다.
▹GOD는 β-D-Glocose와만 특이적으로 반응하는 특성이 있다.
▹β-D-Glocose는 GOD에 의해 Gluconic acid 와 H2O2가 되는데, H2O2 는 Peroxidase의 작용에 의해 4-Aminoantipyrine(약칭 : AAP) 과 Phenol을 산화축합시켜 500nm 정도에 서 흡수하는 빨간색 quinone 색소를 생성한다.
▹우리는 이 quinone 색소를 505nm 파장에서의 흡광도를 Spectrophotometer를 이용하여 재서 실험하였다.

참고자료

· GOD와 여타 혈당 측정 원리에 관해서는
· http://www.wamco.or.kr/ansan/ 안상중앙병원의 임상병리과 자료를 참고하였습니다.
· Spectrophotometer 에 대한 원리와 작동방법은
· www.anyang.ac.kr 안양대 해양생명공학과의 홈페이지와 교수님의 자료를 참고하였습니다.
· 혈당 측정원리와 계산식에 관해서는
· .........‘혈당 측정 원리’ 프린트물을 참고하였습니다.
· Spectrophotometer 에 대한 매뉴얼은
· http://blog.naver.com/alchemy?Redirect=Log&logNo=150016481251에 공개되어있습니다
· 기타, 용어의 정의, 물질의 이름에 관한 것은
· Naver 백과사전 - 용어사전을 활용하였습니다.
· 전반적인 내용은
· Biochemistry - Garrett and Grisham 의 내용을 참고하였습니다.