[화학]크로마토그래피

소개

종이 크로마토그래피와 역상 크로마토그래피 실험으로 각각 아미노산과 식용색소를 분리하고, 크로마토그래피의 원리와 영향을 미치는 요인 등에 대해 간단 명료하게 설명하였다.

목차

Ⅰ. Data And Results
Ⅱ. Discussion

본문내용

Ⅱ. Discussion

<실험 A> 종이 크로마토그래피를 이용한 아미노산의 분리

전개액이 에탄올/물(4:1)인 경우와 n-프로판올/물(4:1)인 경우를 비교해 볼 때 전개 용매의 극성의 세기가 증가할수록 R 값이 커지는 것을 볼 수 있다. 그 이유를 살펴보면 아미노산은 극성을 띄는데 극성 용매일수록 이동상에 더 잘 따라 올라가기 때문에 용매의 극성이 증가할수록 R 값이 증가한다. 따라서 탄소수가 적은 에탄올이 n-프로판올보다 극성이므로 에탄올/물(4:1)을 전개용매로 했을 때 n-프로판올/물(4:1)의 경우보다 R 값이 커진다. 전개액을 n-프로판올/물(4:1)을 사용했을 경우에 각 아미노산의 R 값을 비교해 보면 Ala > His > Asp 순서이다. 이는 각 아미노산의 R-을 살펴보면 Ala의 경우에 R-은 극성이 작은 H이고 Asp는 극성이 큰 카르복실기를 가지고 있다. 또 His는 중간정도의 극성을 가진 R-을 가지고 있다. 따라서 극성이 작은 R-을 가진 아미노산이 큰 R 값을 가질 것이라는 예상과 잘 맞는다.(정지상이 극성인 물이고 이동상은 물보다 극성이 약한 혼합용액이므로) 그러나 전개액을 에탄올/물(4:1)로 했을 경우 His와 Asp의 R 값의 순서가 뒤바뀌는데 이것은 실험의 오차이거나 아니면 각 아미노산의 성질이 다르므로 각각의 아미노산들이 각자 적당한 극성의 전개액에서 최대의 R 값을 가진다고 생각해 볼 수도 있다.
이제 전개액이 n-프로판올/물/0.1N 염산인 경우를 생각해보면 산성에서 Asp는 하나의 양성자를 더 받을 수 있고(-COO-에서) 따라서 +1의 전하를 가지게 된다. 그러나 His의 경우에는 Asp와 마찬가지로 -COO-에서 양성자를 하나 받을 수 있고 양성자를 받을 수 있는 염기인 질소 원자가 하나 더 있으므로 Asp의 경우보다 전하가 1 더 큰 +2의 전하를 가질 것이다. 따라서 극성이 작은 Asp의 R 값이 His보다 크게 나왔다.(Ala의 점은 나오지 않았으나 산성에서 +1의 전하를 가지게 되므로 Asp의 R 값과 비슷한 값을 가질 것으로 예상된다.)
전개액이 염기성인 n-프로판올/물/2% 암모니아의 경우는 위와 반대이다. 염기성에서 Asp는 -2의 전하를, His와 Ala는 -1의 전하를 가질 것이다. 따라서 His와 Ala의 R 값은 비슷한 값을 가지며 Asp의 R 값보다 크게 측정된다.

참고자료

· ① http://user.chollian.net/~hl5nol/chromato-1.htm#ch_won
· ② http://147.46.41.146/~chemlab/exp/exp9.htm