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[화학]크로마토그래피

종이 크로마토그래피와 역상 크로마토그래피 실험으로 각각 아미노산과 식용색소를 분리하고, 크로마토그래피의 원리와 영향을 미치는 요인 등에 대해 간단 명료하게 설명하였다.
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최초등록일 2007.05.26 최종저작일 2007.05
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[화학]크로마토그래피
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    소개

    종이 크로마토그래피와 역상 크로마토그래피 실험으로 각각 아미노산과 식용색소를 분리하고, 크로마토그래피의 원리와 영향을 미치는 요인 등에 대해 간단 명료하게 설명하였다.

    목차

    Ⅰ. Data And Results
    Ⅱ. Discussion

    본문내용

    Ⅱ. Discussion

    <실험 A> 종이 크로마토그래피를 이용한 아미노산의 분리

    전개액이 에탄올/물(4:1)인 경우와 n-프로판올/물(4:1)인 경우를 비교해 볼 때 전개 용매의 극성의 세기가 증가할수록 R 값이 커지는 것을 볼 수 있다. 그 이유를 살펴보면 아미노산은 극성을 띄는데 극성 용매일수록 이동상에 더 잘 따라 올라가기 때문에 용매의 극성이 증가할수록 R 값이 증가한다. 따라서 탄소수가 적은 에탄올이 n-프로판올보다 극성이므로 에탄올/물(4:1)을 전개용매로 했을 때 n-프로판올/물(4:1)의 경우보다 R 값이 커진다. 전개액을 n-프로판올/물(4:1)을 사용했을 경우에 각 아미노산의 R 값을 비교해 보면 Ala > His > Asp 순서이다. 이는 각 아미노산의 R-을 살펴보면 Ala의 경우에 R-은 극성이 작은 H이고 Asp는 극성이 큰 카르복실기를 가지고 있다. 또 His는 중간정도의 극성을 가진 R-을 가지고 있다. 따라서 극성이 작은 R-을 가진 아미노산이 큰 R 값을 가질 것이라는 예상과 잘 맞는다.(정지상이 극성인 물이고 이동상은 물보다 극성이 약한 혼합용액이므로) 그러나 전개액을 에탄올/물(4:1)로 했을 경우 His와 Asp의 R 값의 순서가 뒤바뀌는데 이것은 실험의 오차이거나 아니면 각 아미노산의 성질이 다르므로 각각의 아미노산들이 각자 적당한 극성의 전개액에서 최대의 R 값을 가진다고 생각해 볼 수도 있다.
    이제 전개액이 n-프로판올/물/0.1N 염산인 경우를 생각해보면 산성에서 Asp는 하나의 양성자를 더 받을 수 있고(-COO-에서) 따라서 +1의 전하를 가지게 된다. 그러나 His의 경우에는 Asp와 마찬가지로 -COO-에서 양성자를 하나 받을 수 있고 양성자를 받을 수 있는 염기인 질소 원자가 하나 더 있으므로 Asp의 경우보다 전하가 1 더 큰 +2의 전하를 가질 것이다. 따라서 극성이 작은 Asp의 R 값이 His보다 크게 나왔다.(Ala의 점은 나오지 않았으나 산성에서 +1의 전하를 가지게 되므로 Asp의 R 값과 비슷한 값을 가질 것으로 예상된다.)
    전개액이 염기성인 n-프로판올/물/2% 암모니아의 경우는 위와 반대이다. 염기성에서 Asp는 -2의 전하를, His와 Ala는 -1의 전하를 가질 것이다. 따라서 His와 Ala의 R 값은 비슷한 값을 가지며 Asp의 R 값보다 크게 측정된다.

    참고자료

    · ① http://user.chollian.net/~hl5nol/chromato-1.htm#ch_won
    · ② http://147.46.41.146/~chemlab/exp/exp9.htm
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