Fluorescence Spectroscopy

소개

서울대 생물과학실험3 레폿입니다.

목차

I. Introduction(형광 분석에 관한 개요)
II. DNA-Protein interaction의 high-through application으로서 homogeneous Platform 을 이용한 fluorescence polarization.
# 출처

본문내용

I. Introduction(형광 분석에 관한 개요)
• 형광 및 인광이론
형광현상은 기체, 액체, 및 고체 상태에 있는 복잡한 물질계뿐만 아니라 단순한 화학물질계에서도 나타난다. 가장 간단한 형광현상은 묽은 원자증기에서 나타난다. 흡수한 파장을 변화시키지 않고 그대로 재방출하는 형광을 Resonance radiation 또는 resonance fluorescence 하고 한다. 분자 화학종도 때대로 공명형광을 나타낸다. 그러나 분자 형광은 공형선보다 긴 파장을 중심으로 복사선 띠로 나타나는 경우가 훨씬 많다. 보다 긴 파장 쪽 으로의 이동을 Stokes 이동이라고 한다.
• General Biological Essay : i. Enzyme immuno essay
ii. Radioactive immuno essay
iii. Fluorescence immuno essay
• Luminescence types
발광 시간
i. photoluminescence - fluorescence(형광) 10~10s
phosphorescence(인광) 수 초~ ms scale
-> 에너지 준위 상에서 triplet으로의 전이에 의한 발광
photoluminescence는 fluorophore를 interested structure에 labeling해서 확인하는 방법인데, Absorption ƛ에서 emmision ƛ 쪽으로 장파장의 전이가 일어난 ƛ를 detecting할 수 있다. (VES에서 흠수, 방출 => excited state로의 전이)
‣ fluorophore의 종류 : DAPI, Acridine Orange, Lucifer Yellow, Texas red etc...
정량, 정성적으로 이용 가능
‣ fluorescence reading의 감도(약 1000배)와 선택성에 있어서 UV reading보다 우수 하다

참고자료

· http://www.sigmaaldrich.com/sigma/general%20information/dna-protein_interaction_pep.pdf