달걀 알부민 분리 및 SDS-PAGE 예비리포트

소개

달걀 알부민 분리한 것을 SDS PAGE로 염색하는 것의 예비리포트 입니다.
완벽하게 써서 낸 리포트 입니다.
많은 도움이 될 것입니다. ~~ㅎ

시약조사 완벽하게 했구요, 전기영동, 그리고 모든 실험 원리, 실험 하는 동안 가질수 있는 의문까지 모두 정리했습니다.

목차

1.실험일자
2.보고자
3.공동실험자
4.실험목적
5.실험원리
6.재료 및 기수
7.실험방법

본문내용

따라서 이 2가지 용액을 혼합하면 용액 중의 아세트산이온농도는 거의 아세트산나트륨에서 생긴 것으로 나타나게 된다. 이 용액에 염산 등의 산을 가하면 용액 중에 생긴 대량의 아세트산이온과 반응하여 첨가된 염산의 수소이온 H+는 아세트산을 생성하고 식 ①의 반응이 오른쪽에서 왼쪽으로 진행되므로, 용액 중의 수소이온농도는 거의 변하지 않고 pH는 일정하게 유지된다. 또 수산화나트륨 등의 염기를 가하면 용액 중의 H+와 염기의 OH-가 중화되어 H2O를 생성하는데 식 ①의 반응이 왼쪽에서 오른쪽으로 진행되어 H+를 보충하므로, 용액 중의 수소이온농도는 거의 일정하게 유지되고, pH도 거의 변하지 않는다. 우수한 완충용액은 높은 완충용량(buffer capacity)이 있으며, 또한 조성을 변화시켜 넓은 pH 영역을 커버할 수도 있다.

2) 전기영동 원리 The principle of electrophoresis
단백질이나 핵산 등의 고분자물질은 하전을 띄므로 이를 기초로 하여 이들 분자를 전기장을 띤 매질(겔)에서 이동 분리시켜 이들의 순도나 성질의 분석 및 분리 등에 사용하는 방법을 전기영동(electrophoresis)라 한다. 여기서는 단백질의 전기영동에 관해서 살펴보고자 한다. 단백질의 전기영동은 일반적으로 아크릴아마이드(acrylamide)를 비스아크릴아미드로 결합시킨 중합체인 폴리아크릴아미드 겔(polyacrylamide gel)을 가장 많이 사용한다. 이 폴리아크릴아마이드 젤의 농도가 증가할수록 구멍의 크기가 작아지므로 분리하고자 하는 단백질의 분자량을 알아서 폴리아크릴아마이드 겔의 농도를 정한다
간단히 말해서 전기영동 분석은 전하를 띤 입자들이 외부에서 공급된 전기장의 영향을 받아서 반대 부호를 가진 전극 쪽으로 이동하는 데서 기인한다. 입자들의 움직임은 주위의 molecular sieve로서 역할을 하는 gel matrix와의 상호작용에 의해 지연된다. 전기장의 세기와 gel matrix의 pore size에 따라서 sample 안에 있는 단백질의 이동 속도가 달라진다.
Acrylamide를 가교제 (cross-linker)로 중합한 polyacrylamide gel은 crylamide와 가교제의 농도 및 비율에 의해 gel내 미세통로의 크기를 조절할 수 있어 다양한 크기의 생체 분자들을 분리할 수 있을 뿐만 아니라 높은 정밀도와 고분해능으로 인해 오래 전부터 단백질, 핵산 등의 분리에 널리 사용돼 왔다.
Polyacrylamide gel은 acrylamide 측쇄 기능기가 N,N`-methylene bisacrylamide와 같은 2개의 기능기를 가지는 화합물에 의해 비가역적으로 중합되어 형성된 polymer이다 (그림1).

참고자료

· ㈜엘피스바이오텍, http://www.elpisbio.com/sub/support/protocols/SDS-PAGE-gel.htm
· ◦ The free dictionary, http://acronyms.thefreedictionary.com
· ◦ 컴퓨터기반 과학실험 사이언스 큐브, http://www.sciencecube.com
· ◦ 구글, http://www.google.co.kr/