[화학공학]단백질 정량 (사전보고서)

소개

단백질 정량에 대한 사전보고서 입니다.

목차

1. Principle (原理)
 실험목적
 원리 및 이론
※ 단백질 정량
※ 단백질 정량하는 일반적인 방법
1) 뷰렛시험
2) Lowry 시험
3) 분광학적 정량법
4) 분광광도법
5) Bradford법

※ 단백질
1) 단백질 개요
2) 단백질의 구조
① 1차구조
② 2차구조
③ 3차구조
④ 4차구조
3) 단백질의 구조에 의한 분류
① 단순단백질(simple protein)
② 복합단백질(conjugate protein)
③ 유도단백질(derived protein)

2. Apparatus (裝置)
※ Test tube
※ Pipet
※ 분광광도계

3. Material and Experimental Method
※실험방법
1) 시료만들기
2) 실험과정

※ 시약
※ 참고 문헌

-MSDS-
1) 황산동 (CuSO4‧H2O)
2) 탄산 나트륨 (Na2CO3)
3) 수산화 나트륨 (NaOH)
4) Tartaric Acid (C4H6O6)
5) Phenol

본문내용

1. Principle (原理)
 실험목적

단백질 standard 용액을 제조하고 분광광도계를 사용해서 흡광도를 측정하고 그 값을 이용해서 검량선을 작성 한다. 작성된 검량선을 이용해서 미지시료 속의 단백질 농도를 알아내는 것이 이 실험의 목적이다.

 원리 및 이론

※ 단백질 정량

단백질을 가수분해하면 peptide bond가 끊어지면서 아미노산이 유리된다. 보통 peptide나 단백질을 6N HCl 용액이 들어있는 시험관에서 공기를 제거하고 밀봉한 후 100°에서 8-24시간 동안 가열하여 가수분해시킨다. 이러한 가열조건에서는 모든 peptide bond가 파괴되고 glutamine과 asparagine의 경우에는 side chain의 amide bond도 파괴되게 된다. 또한 tryptophan과 serine, threonine 등의 아미노산은 파괴되기 때문에 이러한 단백질을 정량하기 위해서는 특별히 주의를 기울여야 한다. 산성 용액에서 파괴되는 아미노산을 분석하기 위해서는 별도로 단백질을 alkaline-hydrolysis시킨 후 분석한 후에 보정해야 한다. 즉, 단백질의 양을 정량하기 위해서는 단백질의 본질, 단백질의 시료에 있는 다른 성분들의 본질, 정량분석의 신독도 및 정밀도 등에 따라서 적당한 방법을 선택하여야 한다. 모든 종류의 단백질 농도를 결정할 수 있는 완벽한 방법은 없다. 단백질의 양을 정량하기 위해서는 단백질의 본질, 단백질 시료에 있는 다른 성분들의 본질, 정량분석의 신속도 및 정밀도 등에 따라서 적당한 방법을 선택하여야 한다.

※ 단백질 정량하는 일반적인 방법

1) 뷰렛시험

두개 이상의 펩티드 결합을 가지고 있는 화합물들은 알칼리성 용액에서 묽은 황산구리로 처리하면 자주색을 띠는 물질을 생성한다. 색깔은 구리원자와 두 개의 펩티드 사슬에서 오는 네 개의 질소원자들 사이에서 배위화합물이 형성됨으로써 생기는 것으로 생각되고 있다. 뷰렛 시험은 모든 단백질에 대해서 재현성이 꽤 좋으나 비교적 많은양(1내지 20mg)의 단백질을 정량하는 데 쓰이는 방법이다.

참고자료

· 실험생화학 -탐구당- 한국생화학회
· 기기분석 -대한교과서주식회사 - 이대원 외 5명 저
· 기기분석화학 - 탐구당 - 박기채 저
· www.mecasys.co.kr ㈜메카시스
· http://www.kosha.net 한국산업안전공단