[생물학 ] Peptide sequencing

소개

많은 도움이 되시길... ^^

목차

1.peptide란?

2.peptide구조 결정법
2-1 아미노산&프로테인 분석법
① ninhydrin법 ② Kjeldahl법 ③ Biuret법
④ Phenol 시약법 ⑤ 자외선 흡수 spectrum을 이용하는 방법

3.구조분석기기
1.HPLC 2.탄뎀 질량 스펙트럼
2-2. Partial Hydrolysis of Peptides & Proteins
2-3. C-and N- terminus?
1)N-말단 결정법
① FDNB법 ② Dansyl chloride법 Edman법
2)C-말단 결정법

본문내용

2-1. Amino Acid & Protein Analysis
① ninhydrin법 아미노산과 ninhydrin을 가열반응 시키면 아미노산의 산화분해가 일어나 환원된 ninhydrin과 암모니아, 이산화탄소 aldehyde가 생성되며 다음에 환원된 ninhydrin과 암모니아, ninhydrin이 반응하여 Ruhemann's purple이라는 청자색의 색소가 생성된다. 그 외에도 여러 가지 색소가 생성하나 이것이 주된 생성물이다. 아미노산에서의 발색은 보통 자색이지만 histidine, glycine에서는 적회색 phenylalanine, trosine, aspatate는 청색, proline은 황색으로 발색된다, 2㎍~0.2㎍의 아미노산을 검출할 수 있다. 이 반응은 peptide와 단백질에서도 일어난다.

C-and N- terminus?
각각의 조각과 모체 peptide에서 C-말단과 N-말단을 결정하는 단계

✔ N-말단 결정법
일반적으로 polypeptife 중의 아미노산 배열은 말단에서 결정한다.

① FDNB법(1-fluro-2,4-dinitrobenzene)은 1945년 Sanger가 개발한 가장 고전적인 방법이다. 1-fluro-2,4-dinitrobenzene(FDNB)은 pH8~9, 실온이라는 온화한 조건하에서 peptide의 아미노기와 반응한다.

참고자료

· 없음