[A+ 결과보고서]생화학실습_박테리아(플라스미드)의 형질전환

소개

"[A+ 결과보고서]생화학실습_박테리아(플라스미드)의 형질전환"에 대한 내용입니다.

목차

1. 실험 목적
2. 이론
3. 실험 시약 및 기구
4. 실험방법
5. 실험결과
6. 고찰
7. 참고문헌

본문내용

1. 실험 목적
cloning 에 대해 알아보고, cloning 과정 중 박테리아에 집어넣고자 하는 DNA 를 가진 vector 를 집어넣는 Transformation 을 이해한다.

2. 이론
1) 클로닝(cloning)
클론 (Clone)이란 유전적으로 동일한 세포, 조직, 개체 또는 DNA 집단을 말한다. 즉, 복제(copy)된 생물학적 단위이다. 클로닝(cloning)은 생물학적으로 동일한 유전정보 또는 생명체를 복제하는 과정을 말한다. 특히 분자생물학에서는 특정 유전자를 벡터에 삽입하고 증폭시켜 다량으로 복제하는 기술을 의미한다. 클로닝의 주요 목적은 한정된 양의 출발물질로부터 다수의 재조합 DNA 분자를 형성하는 것이다. 재조합 DNA 의 도입에 이용되는 모델생물 중 세균(bacteria)으로는 대장균(E. coli)이 대표적이다. 박테리아의 증식이 빠르고 쉽게 이루어지기 때문이다. 출아효모(Saccharomyces)는 진핵생물숙주로 흔히 사용된다. 식물세포는 미분화된 전능한 세포인 줄기세포를 만들 수 있고, 배양된 동물세포는 사람이나 동물 유전자의 발현 연구에 사용된다. 완전한 형질전환 생물도 제조할 수 있다. 클로닝을 위한 위한 DNA 절편은 다양한 출처에서 유래한다. 첫번째로는 유전체 라이브러리(genomic library)나 cDNA 라이브러리(cDNAlibrary)와 같은 유전자 라이브러리이다. 유전체 라이브러리는 한 생물의 유전체를 포괄하는 DNA 절편의 모음이다. 제한효소로 DNA 를 작은 절편으로 절단한 후 각 절편을 벡터에 삽입한다. 이 벡터를 숙주세포에 집어넣게되면 재조합 세포의 콜로니가 만들어진다. 두 번째로는, mRNA 로부터 역전사이다. 특정 유전자가 발현된 후 만들어진 mRNA 를 역전사효소를 이용해 cDNA 로 변환한 뒤 클로닝하는 방식이다. 세 번째로는 , PCR 산물을 이용한 것이다. PCR 산물은 특정 유전자나 DNA 서열을 대량으로 증폭하여 확보할 수 있으며, 이 산물을 다양한 방법으로 벡터에 삽입하여 클로닝할 수 있다.

참고자료

· Wikipedia, Molecular cloning
· Wikipedia, pUC19
· 위키백과, 비커
· Jeremy M. Berg, Gregory J. Gatto, Jr, Justin K. Hines, John L. Tymoczko, Lubert Stryer, 생화학, 9판, 범문에듀케이션, 2020, pp.112-113
· Wikipedia, Competent cells
· Wikipedia, LB medium
· Wikipedia, Ethanol
· Wikipedia, Distilled Water
· Wikipedia, Lysogeny broth (LB)
· Wikipedia, Ampicillin
· Wikipedia, Petri dish
· 위키백과, 피펫
· Wikipedia, Microcentrifuge tube