생화학 실험 보고서 - 박테리아에서 DNA 분리

소개

생화학 실험 보고서입니다.

plasmid mini-prepartion(mini-prep)을 통해 박테리아에서 plasmid DNA를 분리하였음.
solution I~III에 대한 설명 있음.

목차

1. 실험목적
2. 이론
3. 실험 시약 및 기구
4. 실험 방법
5. 실험 결과
6. 고찰
7. 참고 문헌

본문내용

1. 실험목적
plasmid DNA 분리에 대해 이해하고, 그 과정 중 하나인 plasmid mini-preparation에 대해 알아본다.

2. 이론
plasmid DNA를 회수하기 위해 plasmid DNA의 분리가 필요하다. plasmid DNA 분리법의 공통적인 세 단계는 plasmid로 형질전환된 bacteria를 대량 배양하는 overnight culture, bacteria를 용해시켜서 순수하지 않은 상태의 DNA를 회수하는 mini preparation(prep), 순수한 plasmid DNA만을 분리하는 과정으로 나뉜다.
bacteria를 대량 생산하기 위해서 항생제가 포함된 LB배지에 colony를 1개 따서 넣고 37℃ shaking incubator에서 12~16시간 동안 overnight culture한다. shaking incubator에서 배양하는 이유는 호기성 bacteria가 잘 자랄 수 있도록 산소를 공급하기 위해서이다. bacteria를 용해시켜서 impure DNA 상태로 회수하기 위해서는 세포벽을 깨서 세포 안의 물질을 터져 나오게 하는 lysis 과정을 거쳐야 한다. alkaline 조건에서 bacterial DNA는 변성되어서 용액에 침전되지만 plasmid DNA는 supercoiled 상태이기 때문에 변성이 크게 일어나지 않는 원리를 사용한다.

참고자료

· 화학백과사전, 암피실린
· 두산백과사전, EDTA
· 화학백과사전, 아세트산칼륨
· 화학백과사전, 아세트산