RNA interference기법을 이용한 유전자 발현 억제

소개

"RNA interference기법을 이용한 유전자 발현 억제"에 대한 내용입니다.

목차

1. Title : RNA interference기법을 이용한 유전자 발현 억제 I (1주차. E.coli 형질전환)
1) <Introduction>
2) <Materials & Methods>
3) <Results>
4) <Discussion>

2. Title : RNA interference기법을 이용한 유전자 발현 억제 Ⅱ (2주차)
1) <Introduction>
2) <Materials & Methods>
3) <Results>
4) <Discussion>

본문내용

1) 실험 목적
유전자 발현 억제를 위해 필요한 gene sequence가 담긴 plasmid DNA를 transformation을 통해 증폭시키는 원리와 방법을 배우고 이해한다.

2) 실험 원리 및 이론
(1) Transformation(형질전환)
Transformation(형질전환)이란 기존 세포가 가지고 있던 것과 다른 종류의 외부 DNA 를 원핵세포에 도입하여 세포가 새로운 형질을 띠도록 하는 것을 의미한다. 이러한 transformation은 bacteria에서 흔히 관찰되며, 실험실에서 특정 DNA 양을 늘리거나 표 적 단백질을 대량으로 생산하고자 할 때 인위적인 유전자 조작에 의해 이뤄질 수도 있다. 실험실에서는 주로 E.coli에 원하는 DNA를 넣어서 transformation을 진행하는데, 이렇게 주로 E.coli를 이용하는 이유는, E.coli는 배양이 쉬우며, 적절한 환경 조건에서 20분에 한 번씩 분열하는 매우 빠른 증식 속도를 가지고 있기 때문이다. 이러한 장점 덕분에 E.coli 와 함께 그 안에 들어가 있는 DNA도 많이 증폭시킬 수 있게 된다.
외부 물질을 잘 받아들일 수 있는 상태의 세포인 Competent cell에 DNA를 도입하는 방법에는 여러 가지가 있는데, 그 중에서 주로 2가지 방법을 많이 사용한다. 먼저 첫 번째 방법은 Heat shock(열충격)으로, 42℃에서 순간적인 heat shock을 주면, cell membrane 내외의 열역학적 균형이 깨지게 되면서 외부 DNA가 cell 안으로 들어가게 되 는 방법이다.
두 번째 방법은 Electroporation(전기천공법)으로, cell에 짧게 전기 충격을 가하면 순간적으로 구멍이 생기게 되는데, 이때 DNA가 cell 안으로 들어가게 하는 방법이다.
이러한 두 가지 방법 외에도 Microinjection(미량주사법), Lipofection, Particle bombardment(유전자총법) 등의 방법이 있는데..

<중 략>

참고자료

· 없음