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중앙대학교 동물번식학및실습 실험레포트1

"중앙대학교 동물번식학및실습 실험레포트1"에 대한 내용입니다.
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최초등록일 2024.06.15 최종저작일 2023.05
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중앙대학교 동물번식학및실습 실험레포트1
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    소개

    "중앙대학교 동물번식학및실습 실험레포트1"에 대한 내용입니다.

    목차

    I. Mouse의 Epididymis 및 sperm을 채취하는 과정을 작성하시오.

    본문내용

    I. Mouse의 Epididymis 및 sperm을 채취하는 과정을 작성하시오.
    수컷 쥐의 정자를 얻는 곳은 cauda epididymis이다. Testis에서 완전 성숙되지
    않은정자가 cauda epididymis에 도달하여 완전히 성숙되고 모여있기 때문에 caudaepididymis를 선택하였다.
    1. 알코올을 뿌려서 털에 묻어있는 균, 바이러스 제거한다.
    2. 복막 전까지만 자르고 껍질을 벗긴다.
    3. 내장이 다치지 않게 Scissors의 뭉툭한 부분으로 자른다.
    4. 지방을 잡아 들어올리면 생식기 line이 보인다. Testis, 지방, 흰색의 epididymis가 보인다.
    5. Cauda epididymis duct 요도쪽으로 연결되는 duct 확인한다. Duct가 아닌 결체조직을 제거한다.
    6. Testis와 cauda epididymis를 잇는 duct는 testis와 그 사이에 지방에 가려져있다. Testis에 가깝게 지방까지 잘라준다.
    7. 반대쪽도 마찬가지 과정을 통해 채취한다.
    8. 붙어있는 잔여 지방을 잘라서 제거한다.
    배지의 pH, 온도가 맞아야 하기 때문에 산도와 온도는 incubator로 맞춰준다. 다
    리 사이를 바늘로 잡고, 핀셋으로 잡아주면 머리가 부푸는데, 머리 끝을 바늘로 찔러서 epididymis를 당겨준다. Epididymis를 당겨주는 이유는 바늘로 당겼을 경우, DC 바닥이 긁히면서 플라스틱 조각이 sample 내로 들어가기 때문이다. Epididymis의 머리를 터뜨리고, 바늘을 구부려서 cauda epididymis를 짜준다.
    II. Epididymis 내에서 정자 성숙과정을 작성하시오.
    Epididymis는 정자의 성숙과 저장에 중요한 역할을 한다. Epididymis 내에서 정자가 성숙하는 과정은 세 가지의 주요 단계로 나눌 수 있다.

    참고자료

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    • 1. Mouse의 Epididymis 및 sperm 채취 과정
      Mouse의 epididymis는 정자 성숙과 저장을 위한 중요한 기관입니다. 정자는 고환에서 생성되어 epididymis를 통해 이동하면서 점진적으로 운동성과 수정능력을 획득합니다. 정자 채취 과정에서는 epididymis를 적출하고 절개하여 정자를 추출하는데, 이 과정에서 정자의 생존력과 품질을 최대한 보존하는 것이 중요합니다. 실험 목적에 따라 다양한 정자 채취 방법이 사용되며, 각 방법의 장단점을 고려하여 적절한 방법을 선택해야 합니다.
    • 2. Epididymis 내 정자 성숙 과정
      Epididymis 내에서 정자는 복잡한 생리학적 변화를 거치면서 성숙합니다. 정자는 고환에서 생성된 후 epididymis의 caput, corpus, cauda 부위를 거치면서 운동성, 수정능력, 형태 등이 점진적으로 향상됩니다. 이 과정에서 정자 표면의 단백질 변화, 미토콘드리아 활성 증가, 핵 응축 등이 일어나며, 이는 정자의 기능적 성숙을 위해 필수적입니다. 정자 성숙 과정에 대한 이해는 불임 치료, 피임약 개발 등 다양한 분야에서 중요한 의미를 가집니다.
    • 3. Hemocytometer를 이용한 cell counting 과정 및 계산 방법
      Hemocytometer는 현미경을 이용하여 세포 수를 정량적으로 측정하는 도구입니다. 이 방법은 정자 수, 혈구 수 등 다양한 생물학적 샘플의 세포 농도를 측정하는 데 널리 사용됩니다. 정확한 세포 계수를 위해서는 샘플 희석, 챔버 충전, 현미경 관찰 등 표준화된 절차를 따라야 합니다. 또한 통계적 분석을 통해 세포 수를 계산하는 방법을 숙지해야 합니다. 이러한 세포 계수 기술은 생물학 연구, 진단, 품질 관리 등 다양한 분야에서 필수적입니다.
    • 4. CASA(Computer-assisted semen analysis)의 목적 및 과정
      CASA는 정자의 운동성, 농도, 형태 등을 자동으로 분석하는 기술입니다. 이 방법은 기존의 수동 분석 방법에 비해 객관성, 정확성, 재현성이 높아 불임 진단 및 치료 모니터링에 널리 사용됩니다. CASA 분석 과정에는 정자 샘플 준비, 현미경 영상 촬영, 영상 분석 소프트웨어를 통한 자동 측정 등이 포함됩니다. 이를 통해 정자의 운동성 매개변수, 농도, 형태학적 특성 등을 신속하고 정량적으로 평가할 수 있습니다. CASA는 불임 진단, 정자 품질 평가, 신약 개발 등 다양한 분야에서 활용되고 있습니다.
    • 5. CTC/Hoechst 33258 double staining의 목적과 원리
      CTC/Hoechst 33258 double staining은 정자의 핵 응축 상태와 세포막 무결성을 평가하는 형광 염색 기법입니다. Hoechst 33258은 DNA에 결합하여 핵을 염색하고, CTC(Chlortetracycline)는 세포막의 Ca2+ 결합 부위를 표지합니다. 이 두 가지 염색을 통해 정자의 핵 응축 정도와 세포막 상태를 구분할 수 있습니다. 이 방법은 정자의 기능적 성숙도와 수정능력을 평가하는 데 유용하며, 불임 진단, 정자 선별, 체외수정 등에 활용됩니다. 또한 정자 동결 보존 과정에서의 손상 정도를 확인하는 데에도 사용됩니다.
    • 6. CTC/Hoechst 33258 double staining의 4가지 패턴 양상
      CTC/Hoechst 33258 double staining에서는 정자의 핵 응축 상태와 세포막 무결성에 따라 4가지 패턴이 관찰됩니다. 1) F 패턴: 핵이 약하게 염색되고 세포막이 약하게 염색되어 미성숙 정자를 나타냅니다. 2) B 패턴: 핵이 강하게 염색되고 세포막이 약하게 염색되어 성숙한 정자를 나타냅니다. 3) AR 패턴: 핵이 강하게 염색되고 세포막이 강하게 염색되어 acrosome 반응이 일어난 정자를 나타냅니다. 4) NA 패턴: 핵과 세포막이 모두 약하게 염색되어 사멸한 정자를 나타냅니다. 이러한 4가지 패턴 분석을 통해 정자의 성숙도와 기능적 상태를 평가할 수 있습니다.
  • 자료후기

      Ai 리뷰
      쥐의 정자 채취와 성숙 과정, 세포 계수와 정자 운동성 분석, 정자 상태 확인 방법 등 다양한 실험 기법을 자세히 설명하고 있다.
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