동식물분류학실험_미세조류의 DNA 추출

목차

Ⅰ. 서론
Ⅱ. 재료 및 방법
Ⅲ. 결과
Ⅳ. 토의
Ⅴ. 참고문헌

본문내용

PCR은 시험관 내에서 DNA 분자의 특정 염기 서열을 선택적으로 빠르게 증폭하는 기술이다. PCR은 유전자를 조작하여 연구하는 모든 실험에 사용되며, 유전 질환이나 세균, 바이러스, 진균 등에 의한 감염성 질환의 진단에도 사용되고 있다. PCR은 세포 내에서 일어나는 DNA 복제 과정을 모방한 것으로 DNA 변성(Denaturation), 프라이머 결합(Annealing), DNA 합성(extension)의 3단계로 이루어진다. DNA 변성 단계에서는 DNA를 가열하여 단일 가닥으로 분리한다. 분리된 각각의 단일가닥은 새로운 DNA 가닥을 합성하는 주형 역할을 하게 된다. 변성 단계에 뒤이어 온도를 낮추면 프라이머가 주형 DNA 가닥에 결합하게된다. 프라이머는 DNA의 특정 염기 서열에만 결합하기 때문에 DNA에서 원하는 유전자를 선택적으로 증폭할 수 있다. DNA 합성 단계에서는 DNA 중합 효소에 의해 주형 DNA 가닥에 새로운 DNA 가닥이 합성된다 이러한 과정을 계속 반복하면 원하는 DNA 단편이 증폭된다(심규철 외 5명, 2012).
프라이머는 DNA나 RNA 합성 과정에서 출발점 역할을 하는 짧은 단일 DNA 가닥이다. PCR에서는 증폭하고자 하는 DNA 부위의 말단에 상보적인 염기 서열을가진 프라이머를 이용하여특정 DNA 부위를 정확하게 찾아 증폭할 수 있다.(심규철 외 5명, 2012)
DNA 추출은 생물로부터 whole genome DNA를 추출하는 것으로, 여러 방법이 있다. 그 중 spin column 추출방법 등의 고체상 추출은 DNA가 silica에 결합한다는 것을 이용한다. DNA를 포함하는 샘플은 silica 또는 silica beads 또는 chaotropic salts 가 포함된 컬럼에 분주된다. chaotropic salts는 가닥 사이의 수소 결합을 방해하고 핵산이 소수성이 되도록하여 DNA와 silica의 결합을 촉진한다. 이렇게 하면 인산염 잔류물이 노출되어 흡착 할 수 있다. 용액의 chaotropic salts 및 다른 불필요한 성분을 제거하기 위해 에탄올을 이용하여 실리카에 DNA의 흡착을 도와준다. 그런 다음 DNA는 염도가 낮은 수용액으로 재수화되어 DNA 를 용출 할 수 있다.(Richard,2015)..

참고자료

· 심규철 외 5명. 2012. 생명과학Ⅱ. 비상교육. pp.182-183
· Richard, 2015). Forensic biology (2nd ed.). Boca Raton
· Taylor R. and others. 2018. Campbell biology : concepts & connections Ninth edition. Pearson. pp.246-247