미생물학 실습 평판계수법과 catalase test 레포트

소개

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목차

1.실험제목(title)
2.실험날짜(date):
3.실험목적(purpose):
4.실험 준비물(material-reagent, instrument)
5.실험 방법(method)
6.실험 결과(result)
7.실험 고찰(discussion)
8.참고문헌(reference)

본문내용

· 실험제목(title): 평판계수법과 catalase test
· 실험날짜(date):
· 실험목적(purpose): 박테리아의 세포수를 계산하고 catalase 유무를 판별

· 실험 준비물(material-reagent, instrument)
⑴ 평판계수법
피펫, LB agar plate, tube, spreader, 패트리접시, PBS용액, 배양된 E.coli, 알콜램프
⑵ catalase test
피펫, 슬라이드글라스, DW, loop, 배양된 E.coli와 S.aureus, 3% H202

· 실험 방법(method)
⑴ 평판계수법
① tube에 PBS 450μl + E.coli 50μl을 넣고 Ecoli를 까지 serial dilution 한다.
② 홀수 또는 짝수승을 정하여 5개의 LB agar plate에 dilution 농도를 labelling 해주고, 5개의 tube만 dilution 한 E.coli를 50μl씩 떨어뜨린 후, spreading한다.
③ 37℃에서 24시간 배양한다.
④ 30~300개 사이의 colony가 나온 plate에서 colony 수를 세어 원액에 있었던 E.coli의 수를 계산한다.
⑵ catalase test
① 슬라이드 글라스에 labelling을 한다.
② DW를 각 슬라이드 글라스에 10μl 떨어뜨린 후, 18-24시간 배양된 bacteria colony를 loop로 따서 깨끗한 유리 슬라이드에 도말한다.
② 도말된 bacteria 위에 3% H2O2를 50μl 떨어뜨려 거품이 발생하는지 관찰한다. 거품이 생기면 양성이며, 거품 발생이 없으면 음성으로 판독한다.

참고자료

· Richard A. Harvey, Cynthia Nau Cornelissen, Bruce D. Fisher, 『Lippincott's Illustrated Reviews: Microbiology 3rd edition』, 바이오사이언스출판, 2011
· Alfred Brown, Heidi Smith, 『Benson's Microbiological Applications 13th edition』, 동화기술, 2015, 307p
· 박철희·김관천·정병곤·조기안, 『미생물학실험』, 동화기술, 2006, 135-159p
· Surabhi Mishra and James Imlay, Why do bacteria use so many enzymes to scavenge hydrogen peroxide?, Arch Biochem Biophys. 2012 Sep 15; 525(2): 145–160.
· (https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3413786/)
· https://www.microgiene.com:9041/shop/item.php?it_id=1473667330
· https://en.wikipedia.org/wiki/Staphylococcus_aureus