Cell counting and seeding on plate for downstream experiment A+레포트

소개

Cell counting and seeding on plate for downstream experiment A+레포트입니다.

목차

1. Title
2. Date
3. Name
4. Purpose
5. Materials
6. Methods
7. Results
8. Discussions
9. Project
10. Reference

본문내용

1. Title
Cell counting and seeding on plate for downstream experiment

2. Date

3. Name

4. Purpose
Hemocytometer의 원리를 이해하고, 이를 통해 실험에 필요로 하는 적정량의 세포 수를 계산할 수 있다.

5. Materials
MCF-7 Cells (cultured in T25 flask), DPBS, 0.05% Trypsin-EDTA solution, Media (RPMI1640, FBS, P/S), alcohol lamp, pipette aid, serological pipette, incubator, conical tube, centrifuge, micropipette, tip, rack, beaker, 1.5㎖ ep-tube, trypan blue solution, hemocytometer, 35㎜ dish, 70% ethanol, tissue, clean bench, 광학현미경, 계수기

6. Methods
① 4℃에서 냉장보관 중이던 media를 37℃ water bath에서 충분히 pre-warmed.
② Clean bench에 넣기 전, pre-warmed media 및 필요한 실험기구들을 70% 에탄올로 소독한다. (Cell이 들어있는 flask는 에탄올로 소독하지 않고 clean bench로 옮겨준다.)
③ 세포주를 배양 중인 flask 내부의 media를 pipette aid를 이용해 aspiration & discard.
④ DPBS washing: DPBS 3㎖을 flask에 조심히 분주하고 좌우로 gently washing 해준 후, DPBS를 다시 aspiration & discard.

참고자료

· DAWIN bio - 일회용 hemocytometer
· https://dawinbio.com/361/?idx=425
· 의생명과학 실험서, 이종호, 라이프사이언스, 2021, p. 77~85
· 네이버 지식백과(생명과학대사전) - Trypan blue
· https://terms.naver.com/entry.naver?docId=432330&cid=60261&categoryId=60261
· Pubmed - Trypan blue exclusion test of cell viability
· https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/18432654/
· 네이버 지식백과(간호학대사전) - Hemocytometer
· https://terms.naver.com/entry.naver?docId=483751&cid=60408&categoryId=55558
· NIH- Flow Cytometry: An Overview
· https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC5939936/
· 네이버 지식백과(분자세포생물학백과) - Flow cytometry
· https://terms.naver.com/entry.naver?docId=5930079&cid=61233&categoryId=61233
· 네이버 지식백과(식품과학사전) - CFU
· https://terms.naver.com/entry.naver?docId=6165095&cid=67725&categoryId=67725