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LC-MS/MS와 표준혈장시료 및 검량선 레포트

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최초등록일 2023.12.07 최종저작일 2023.06
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    소개

    "LC-MS/MS와 표준혈장시료 및 검량선 레포트"에 대한 내용입니다.

    목차

    1. LC-MS/MS
    2. 표준혈장시료 및 검량선
    3. 출처

    본문내용

    Liquid chromatography(LC)의 물리적 분리 기능과 mass spectrometry(MS)의 질량 분석 기능을 결합한 분석 화학 기술이다. 고성능액체크로마토그래피(HPLC)를 이용해 물질을 분리 후, 분리된 물질을 이온화시켜 분리관과 검출기를 이용해 그 물질의 질량을 측정함으로써 정성 확인이 가능하고, 시료 내의 물질의 양을 정량할 수 있는 장비이다. LC/MS는 액체 크로마토그래피를 분리 시스템으로 사용하고 질량 분석기를 검출 시스템으로 사용하므로 액체 크로마토그래피의 높은 분리와 질량 분석의 고감도 특성을 모두 가지고 있다.

    1) 정상 크로마토그래피
    극성 컬럼에 비극성 이동상을 사용하는 방법으로, 이동상에 대한 용해도가 가장 높은 비극성 물질이 가장 먼저 용출된다. 이동상의 극성을 증가시켰을 때 머무름 기간이 증가한다. 정지상으로 극성 작용기가 결합한 silica, alumina를 이용하고 이동상으로 ethyl ether, chloroform, n-hexane과 같은 비극성 용매를 사용할 수 있다.

    참고자료

    · Chace DH, Kalas TA, Naylor EW (November 2003). "Use of tandem mass spectrometry for multianalyte screening of dried blood specimens from newborns". Clinical Chemistry. 49 (11): 1797–817. doi:10.1373/clinchem.2003.022178. PMID 14578311
    · Moosavi, S. M., & Ghassabian, S. (2018). Linearity of Calibration Curves for Analytical Methods: A Review of Criteria for Assessment of Method Reliability. InTech. doi: 10.5772/intechopen.72932
    · Gülay Büyükköroğlu, Devrim Demir Dora, Filiz Özdemir, Candan Hızel, Chapter 15 - Techniques for Protein Analysis, Editor(s): Debmalya Barh, Vasco Azevedo, Omics Technologies and Bio-Engineering, Academic Press, 2018, Pages 317-351, ISBN 9780128046593, https://doi.org/10.1016/B978-0-12-804659-3.00015-4.
  • AI와 토픽 톺아보기

    • 1. LC-MS/MS 분석 기술
      LC-MS/MS는 현대 분석화학에서 가장 강력하고 신뢰할 수 있는 기술 중 하나입니다. 액체크로마토그래피와 질량분석기의 결합으로 복잡한 혼합물에서 특정 화합물을 선택적으로 검출하고 정량할 수 있습니다. 높은 감도, 특이성, 정확도를 제공하여 의약품, 환경오염물질, 식품 첨가물 등 다양한 분야에서 광범위하게 활용됩니다. 특히 극미량 성분 분석에 탁월하며, 복잡한 기질에서도 신뢰성 있는 결과를 얻을 수 있다는 점이 큰 장점입니다. 다만 장비 비용이 높고 전문적인 기술 지식이 필요하다는 제한점이 있습니다.
    • 2. 역상 크로마토그래피
      역상 크로마토그래피는 LC-MS/MS 분석에서 가장 널리 사용되는 분리 기법입니다. 비극성 고정상과 극성 이동상을 사용하여 대부분의 유기화합물을 효과적으로 분리할 수 있습니다. 다양한 화합물에 적용 가능하고, 재현성이 우수하며, 메서드 개발이 상대적으로 용이합니다. 특히 생의학 분석, 제약 산업, 환경 분석 등에서 표준 기법으로 인정받고 있습니다. 그러나 극성이 매우 높거나 낮은 화합물의 분리에는 제한이 있을 수 있으며, 이동상 선택과 pH 조절이 중요한 최적화 요소입니다.
    • 3. MS/MS 분석 원리
      MS/MS 분석은 이중 질량분석 기술로, 모분자 이온을 선택한 후 충돌 유도 해리를 통해 특성 단편 이온을 생성하고 검출합니다. 이 과정은 화합물의 구조 정보를 제공하고 매우 높은 선택성을 달성합니다. 다중 반응 모니터링(MRM) 모드에서는 특정 전이만 추적하여 배경 노이즈를 최소화하고 감도를 극대화합니다. 이러한 원리는 복잡한 기질에서도 목표 화합물을 정확히 정량할 수 있게 합니다. 다만 각 화합물마다 최적의 충돌 에너지와 단편 이온을 결정해야 하므로 메서드 개발에 시간이 소요될 수 있습니다.
    • 4. 검량선 작성 및 농도 측정
      검량선 작성은 정량 분석의 핵심 단계로, 표준물질의 농도와 신호 강도 간의 관계를 수립합니다. 적절한 농도 범위 선택, 충분한 수의 표준점 확보, 선형성 검증이 중요합니다. 일반적으로 R² 값이 0.99 이상이어야 신뢰할 수 있는 검량선으로 간주됩니다. 검량선의 정확성은 최종 분석 결과의 신뢰성을 직접 결정하므로, 표준물질의 순도, 보관 조건, 측정 환경 등을 엄격히 관리해야 합니다. 또한 정기적인 검증과 품질관리를 통해 검량선의 유효성을 지속적으로 확인하는 것이 필수적입니다.
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