서울대학교 생물학 실험 A+ PCR

소개

"생물학 실험 PCR"에 대한 내용입니다.

목차

Ⅰ. Abstract
Ⅱ. Introduction
Ⅲ. Materials & Method
Ⅳ. Result
Ⅴ. Discussion
Ⅵ. References

본문내용

Ⅰ. Abstract
유전학을 깊게 연구함에 따라 이를 약학, 범죄학, 유전 검사 등에 도입하고자 하였고, 현대의 유전학의 기본이 되는 DNA technology를 모듈3의 대주제로 삼아 과정, 원리를 이해하고자 하였다. DNA technology 중 첫번째 실험에서 vector에 외부DNA를 넣는 형질전환을 실험하였다. 이후 E.coli의 DNA의 특성을 이용해 배지 도말을 하여 colony의 색상 여부로 insert 성공을 확인하였고, 두번째 실험인 PCR 통해 DNA insert 성공여부와 size marker을 통해 DNA 길이를 확인하고 전기영동의 원리를 공부하였다. 모듈3에서는 하나의 목표DNA를 도입하였으나, 여러 개의 DNA를 도입 시 확인하는 방법으로, 세번째 실험에서 제한효소로 plasmid를 자르고 조각들을 전기영동시켜 결과를 관찰한 후 미지의 plamid에 어떤 유전자가 insert 되었는지 확인하였다. 이후 discussion으로 추가적 이론과 또 다른 DNA technology인 STR과 RFLP대해 알아보았다.

Ⅱ. Introduction
DNA 클로닝이란 원하는 DNA를 조작하고 복제하여 무수히 많은 복제 DNA를 얻는 기술이다. DNA 클로닝은 크게 외부 유전자를 세포내로 넣어 숙주세포가 새로운 유전형질을 갖게 되는 형질전환, colony PCR, 제한효소 처리와 전기영동의 과정을 통해 이루어지고, 성공여부를 확인할 수 있다.[1] 높은 효율로 목표 DNA의 복제를 얻기 위해서는 DNA를 직접 복제하는 것이 아닌, 유전자 운반체에 넣고 이를 세포에 넣어 복제해야 한다. 이때 유전자 운반체를 vector라고 하고, 이번 실험에서는 E.coli의 세포 내에 독립적으로 존재하는 DNA인 plasmid DNA로 사용할 것이다.[2] Plasmid는 복제시작점인 origin, 제한효소의 작용부위인 MCS(multi-cloning site), 목표유전자가 plasmid에 연결이 잘 되었는지 확인하기 위한 lacZ 유전자 부위, 형질전환의 여부를 확인할 수 있는 ampicillin resistance gene 부위로 구성되어 있다.

참고자료

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· All about Real-Time PCR, BIONEER: Korea, 1 (2020)
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· http://www.bionicsro.co.kr/contents/serviceSTRanalysis (STR analysis: Genotyping Service, 바이오닉스: 서울)