형광현미경을 이용한 세포주기 분석 실험보고서

소개

"Cell cycle analysis using fluorescence microscopy 형광현미경을 이용한 세포주기 분석 실험보고서"에 대한 내용입니다.

생명과학실험3 세포생물학 파트 실험보고서입니다.

해당 과목 성적 A를 받은 레포트입니다.

목차

1. Introduction
2. Materials and Methods
3. Discussion
4. Reference (참고문헌)

본문내용

-실험 목적
형광물질이 labelling된 Ab와 형광현미경을 이용하여 세포주기에 대한 nocodazole과 serum-free media의 영향을 알아본다.

-이론
1) 세포주기(cell cycle) 각 phase 특징 및 체크포인트(checkpoint) 조절 원리
체세포분열의 세포주기는 크게 세포분열(M)기와 간기(interphase)로 이루어진다. 간기는 G1기, S기, G2기 세 시기로 나뉜다. M기는 핵분열과 세포질분열로 크게 나뉘며 세부적으로는 전기, 전중기, 중기, 후기, 말기로 나뉘어진다. 세포는 성장하고(G1), 염색체를 복제하며 계속 성장하고(G2), 세포 분열을 위한 준비를 끝내가면서 더욱 더 성장(G2)한 후애 분열(M)을 한다.
M기의 전기와 전중기에는 염색체가 응축되고 핵막과 인이 소실되며 방추사가 형성되기 시작한다. 중기에는 염색체가 방추체의 양극 사이 중앙에 위치한 가상의 면인 중기판에 모인다. 후기는 핵분열 중 가장 짧은 단계이며 2개의 자매염색분체가 분리된다. 떨어져 나온 2개의 염색체는 방추사부착점 미세소관이 짧아짐에 따라 세포의 반대편 끝으로 이동한다. 세포는 동원체에 결합하지 않은 미세소관이 길어짐에 따라 신장된다. 말기에는 인과 핵막이 다시 나타나며 염색체의 응축이 풀린다.
세포주기에서의 확인점(checkpoint)는 정지 및 출발 신호에 의해 주기가 조절되는 결정적 조절 시점이다. 주기를 조절하는 신호들은 신호전달경로를 거쳐 세포 내에서 전달되며 세 가지의 주요 체크포인트가 G1, G2, M기에 나타난다. 포유동물에서는 제한점(restriction point)이라 불리는 G1 체크포인트가 가장 중요한 체크포인트이다. 제한점에서 출발 신호가 주어지면 세포는 대개의 경우 G1, S, G2, M기를 지나 분열을 마치게 된다.

참고자료

· Bruce Alberts, Alexander Johnson, Julian Lewis. Molecular Biology of The Cell (Sixth Edition). Garland Science.
· Reece, Urry, Cain. Campbell Biology (Ninth Edition). Pearson.
· Kim, Ji-Ye. "The value of Phosphohistone H3 as a proliferation marker for evaluating invasive breast cancers; With an emphasis on comparisons to Ki-67." 국내석사학위논문 연세대학교 일반대학원, 2016. 대한민국
· 조보연, and 최태부. "쥐 하이브리도마 세포배양을 위한 무혈청 배지개발 (Ⅰ)." 한국미생물·생명공학회지 17.5 (1989): 481-488. 최적 배지성분의 결정, Determination of Optimal Media Composition