[생명과학실험레포트]_Simple tandem repeat를 이용한 인간유전자 분석 A+레포트 입니다.

소개

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목차

1. ABSTRACT
2. INTRODUCTION
3. MATERIALS AND METHODS
4. RESULTS
5. DISCUSSION
6. REFERENCES

본문내용

ABSTRACT
인간의 염색체는 diploid 형태로 존재하기 때문에 한 개의 유전자 형질에 대해 각 2개의 allele을 갖게 된다. 이때 그 두가지 allele이 서로 sequence가 동일하다면 homozygote가 되고 sequence가 다르다면 heterozygote가 된다. 이러한 allele는 개인마다 서로 차이를 가지기 때문에 이러한 점을 이용하여 STR(simple tandem repeat)을 통해 인간유전자를 분석할 수 있다.
이번 실험에서는 구강 상피세포를 채취하여 PCR(Polymerase Chain Reaction)을 통해 유전자를 증폭시킨 후, PAGE(polyacrylamide gel electrophoresis)를 이용하여 밴드의 크기를 비교함으로써 3번 염색체의 D3S1358유전자가 개인마다 몇 번씩 반복되어 있는지 확인하여 각 개인 마다 STR(simple tandem repeat)이 어떻게 다른 지 분석하는 실험을 하였다.

INTRODUCTION
 PCR (Polymerase Chain Reaction)
PCR은 검출은 원하는 특정 표적 유전물질을 증폭시키는 방법이다. PCR을 진행하기 위해서는 원하는 특정 DNA와 Taq polymerase, 다량의 뉴클레오티드, primer(sense, antisense)가 필요하다. 이후 첫번째로 denaturation이라는 단계를 통해 약 94’C로 가열하여 double strand DNA를 single strand DNA로 변성시킨다. 두번째로 annealing이라는 단계를 통해 단일 가닥으로 풀린 single strand와 primer가 결합하도록 하기위해 약 50~65’C로 온도를 낮춰서 진행한다. 마지막으로 elongation이라는 과정을 통해 taq polymerase가 약 74’C에서 dNTP를 재료로 하여 5’3’ 방향으로 DNA를 합성하게 되면 한 cycle이 끝나게 된다. 위와 같은 cycle을 반복하여 원하는 특정 DNA를 증폭시킬 수 있다.

참고자료

· David L. Nelson, Michael M. Cox. Lehninger Principles of Biochemistry (5th edition, 2008), W. H. Freeman and Company. p319-321.
· "Comparative genomics and molecular dynamics of DNA repeats in eukaryotes". Microbiology and Molecular Biology Reviews. 72 (4): 686–727.
· Saiki RK, Gelfand DH, Stoffel S, Scharf SJ, Higuchi R, Horn GT, et al. (January 1988). "Primer-directed enzymatic amplification of DNA with a thermostable DNA polymerase". Science. 239 (4839): 487–91