[생명과학실험레포트]-Immunoprecipitation A+레포트 입니다.

소개

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목차

1.실험주제 및 목적(introduction)
2.결과(result)
3.고찰(discussion)
4.Reference

본문내용

2.실험주제 및 목적(introduction)
 Mammalian cell culture의 실험목적
동물세포(animal cells)를 배양하는 목적은 크게 두 가지로 효소, 호르몬, 백신, 면역 조절인자, 항암제 등 여러 종류의 의료용 치료 단백질을 생산하는 것과 장기(organ)나 조직을 만들어 내는 일이다. 이를 위해 세포를 배양하여 살아있는 세포와 죽은 세포의 counting을 하여 세포의 생존율을 계산함으로써 실험 연구에 사용되는 세포가 잘 유지되고 있는지 확인할 수 있고, 세포 생존에 유리하도록 환경을 변화시켜주거나 이식시켜 실험에 사용할 수 있도록 한다.
 DNA plasmid transfection 실험목적
transfection이란 정제된 바이러스 핵산이나 플라스미드를 진핵세포에 도입하는 것을 말한다. 대상 세포가 원핵세포일 경우 형질전환이라고 한다. 핵산은 강한 음전하를 띠기 때문에, 똑같이 음전하를 띠고 있는 진핵세포의 세포막을 통과시키기 위해 화학적, 혹은 물리적인 방법을 이용한다. 화학적 방법에는 양이온, 양이온 중합체, 양이온 리포좀등이 사용된다. 물리적으로는 DNA를 핵 안으로 직접 주입하는 미세주입이나,강한전기장에 노출시켜 일시적으로 세포 막의 투과성을 높이는 전기천공법이 사용되기도 한다. 최근에는 나노물질을 트랜스펙션을 하는데 사용하기도 한다. 이번실험에서는 고분자(PEI)-유전자 복합체를 이용하여 동물 세포에 plasmid DNA를 넣어 세포의 형질을 전환하였다.

참고자료

· Mammalian cell culture의 실험목적
· https://www.cheric.org/files/education/cyberlecture/e200702/e200702-801.pdf
· Transfection
· Luft C. and Ketteler R. 2015. Electroporation knows no boundaries. J Biomol Screen. 20(8): 932-942.
· HEK293T:
· “Production of high-titer helper-free retroviruses by transient transfection”. 《Proc. Natl. Acad. Sci. USA》 90 (18):8392–8396.1993년9월15일. doi:10.1073/pnas.90.18.8392. PMC 47362. PMID 7690960
· HEK 239 CELL
· : 바이러스학' 류왕식저 (라이프사이언스, 2010)
· “A mammalian host-vector system that regulates expression and amplification of transfected genes by temperatureinduction”.《Science》 227 (4682):23–28.1985년1월4일. doi:10.1126/science.2981116. PMID 2981116
· IP
· :Bonifacino, J.S., Dell'Angelica, E.C. and Springer, T.A. (2001), Immunoprecipitation. Current Protocols in Immunology, 41: 8.3.1-8.3.28.
· HEPS
· “Acid-base buffering in organ preservation solutions as a function of temperature: new parameters for comparing buffer capacity and efficiency”. 《Cryobiology》 45 (1): 33–48. 2002. doi:10.1016/S0011-2240(02)00104-9. PMID 12445548
· ETGA
· https://bio-chae.com/immunoprecipitation-buffer/
· KCl
· https://info.gbiosciences.com/blog/bid/180111/protein-lysis-buffer-101-components-and-functions-part-1
· IP buffer inhibitor
· https://blog.daum.net/sunny224/8042247