[생명과학실험 레포트]_이온교환 크로마토 그래피 A+ 레포트 입니다

소개

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목차

1. lon exchange chromatography
2. introduction
3. materials & methods
4. discussion
5. reference

본문내용

1. lon exchange chromatography
실험 날짜:
실험 주제: Ion exchange chromatography
실험 목표: Column chromatography와 ion exchange chromatography에 의한 단백질 정제원리를 이해하고 DEAE ion exchange column을 이용하여 Alkaline phosphatase를 분리한다.

2. introduction
 column chromatography(관 크로마토 그래피)의 원리- (partition theory)
column chromatography는 혼합물을 구성하고 있는 매우 유사한 성분들을 분리할 수 있는 중요한 분리법이다. chromatography에서 물질들은 이동상과 정지상으로 구성되어 있는 계에 놓여있는데 이때 시료는 이동상에 의해 이동된다. 이러한 이동상은 대개 플라스틱이나 유리로 만들어진 관 속에 고정되어 있는 용해되지 않는 정지상을 통해 지나가게 되는데 용질이 여기를 천천히 지나가 새로운 정지상에 닿으면, 두상에 대한 전하와 크기, 결합 친화력 등의 차이에 따라 분리되어진다. 그 원리는 분배(partition)와 흡착(adsorption)이다.
(1)분배이론(partition theory)
분배란 분석체들의 정지상과 상호 분배계수의 차이에 의해 분리되는 것이다. 다시 말해, 일반적으로 두 상이 동일한 용질을 포함한다면 용질은 두 상 사이에서 분포하게 되는데 이것을 분배(partition)이라 하며 이와 관련된 평형은 두 상에서 용질 농도의 비인 분배계수 K로 나타내어진다.

여기에서 Xs는 정지상에서 있는 용질의 농도이고 Xm은 이동상에서 있는 용질의 농도이다. K 값이 크면 클수록 더 많은 분자들이 정지상에 있게 되고 이것은 용질이 컬럼을 통해 느리 게 이동함을 보여준다. 즉 다른 K 값을 갖는 물질들은 컬럼을 통해 이동하는 속도가 다름으로 쉽게 분리가 이루어진다.

참고자료

· “column chromatography”에 대한 reference: 대한화학회, 표준 일반화학실험 제 7판, 천문각, 2011, pp. 73~82
· “Ion-exchange chromatography”, ” Regeneration” 에 대한 reference: 오도석, CHROMATOGRAPHY 1st reviced edition, 학술편수관, 2012. pp. 13~15, 82~83, 282~287
· “Alkaline phosphatase”에 대한 reference: Ninfa, Alexander J.; Ballou, David P.; Benore, Marilee (2010). 《Biochemistry and Biotechnology》. USA: John Wiley & Sons, INC. 229–230쪽. ISBN 978-0-470-08766-4.