[아주대 생명과학실험] Plasmid DNA 추출 실험 보고서

소개

몇 시간 동안 직접 조사하고 타이핑해서 A+ 받은 보고서입니다.
여러분의 점수를 위해 전체 카피하지 마시고 참고용으로 봐주시거나 !반드시! 수정 부탁드립니다.
보시기 편하게 워드로 전부 수정해서 올립니다 :)

목차

1. 실험 주제
2. 실험 목적
3. 실험 원리
4. 실험 방법
5. 실험 결과
6. 고찰
7. 참고문헌

본문내용

1. 실험 주제
Plasmid DNA 추출 실험

2. 실험 목적
플라스미드(plasmid)라는 염색체 이외의 자가복제 DNA의 분리를 통하여 DNA의 추출 및 정제 방법의 원리를 배우고, DNA의 이화학적 특성을 이해한다.

3. 실험 원리
3.1 원핵세포
원핵세포는 우선 핵막이 없고 유전 물질이 불규칙한 모양으로 핵양체 부위에 존재한다. 핵양체는 하나의 원형 DNA가 섬유 뭉치로 뭉친 모양이다. 이 핵양체는 단백질이 결합되어 있지만 히스톤 단백질이 없어 염색체로 뭉칠 수 없기 때문에 세포 분열 시 염색체의 이동을 관찰할 수 없다. 또한 유사분열을 하지 않고 엽록체, 소포체, 골지체, 미토콘드리아와 같은 세포 소기관과 구조물이 존재하지 않는 대신 원핵세포막이 호흡효소반응, 인지질합성반응 등의 세포소기관 기능을 대신한다.

3.2 진핵세포
핵막이 존재해 핵이 세포질에서 분리되어 있으며 유전 물질이 핵 속에 존재한다. 핵은 2겹의 막으로 되어있고 핵 속에는 인, 염색사, 핵질 등의 구조가 존재한다. 세포질에는 미토콘드리아, 골지체, 소포체, 리소좀과 같은 세포내소기관을 갖추고 있으며 이 소기관들은 특정 역할을 수행하도록 분화되어 있다. 이로 인해서 원핵세포에 비해 상대적으로 효율적인 생존을 할 수 있다.

3.3 플라스미드 DNA
일부 진핵생물들과 몇몇 원핵생물이 세균의 세포 내에 독자적으로 복제나 증식할 수 있는 자신의 염색체 DNA 이외에 또 가지고 있는 짧은 고리형 DNA를 의미한다. 이 플라스미드 DNA는 정제 과정 중 변형에 의해 3가지의 형태로 변할 수 있다. 염기쌍을 이루지 못한 상태인 Supercoiled DNA , plasmid의 두 가닥 중 한 가닥이 잘린 구조인 Open-circular DNA (nicked circular), plasmid의 두가닥이 모두 잘린 구조인 Linear DNA의 형태로 구분된다.
플라스미드는 복제 원점을 갖고 있어 세균 내부의 DNA 복제 기구들을 이용해 자가 복제가 가능하며 유전자가 존재할 시 정상적으로 발현도 가능하다. 플라스미드는 다른 세포로 전달될 수 있는 특성이 있는데 세포 간의 접합(conjugation) 과정이나 혹은 주변 세균을 통해서, 직접 타 세포막을 뚫고 옮겨갈 수도 있다.

참고자료

· PLASMID, Wikipedia, https://en.wikipedia.org/wiki/Plasmid, (2022.04.19)
· Agarose Gel Electrophoresis of DNA, waybackmachine, https://web.archive.org/web/20110610173439/http://arbl.cvmbs.colostate.edu/hbooks/genetics/biotech/gels/agardna.html
· EcoRI, Wikipedia, https://en.wikipedia.org/wiki/EcoRI, (2021.09.29)
· Alkaline lysis (mini preps), thebumblingbiochemist, https://thebumblingbiochemist.com/365-days-of-science/alkaline-lysis-mini-preps/, (2021.10.27)