[대학생명과학전공실험] Cell seeding, sub culture & Crystal violet assay 실험 보고서

목차

1. 실험의 목적
2. 실험의 원리 및 이론
3. 실험과정
4. 실험결과
5. 고찰
6. 참고문헌

본문내용

1. 실험의 목적
- Cell seeding과 Cell culture를 이해한다.
- Sub culture하는 과정을 하는 방법을 알아본다.
- 미생물학의 사용되는 시약인 Crystal violet assay을 사용해보고 실험한다.

2. 실험의 원리 및 이론
- Cell line
Cell line은 세포주라고 하며 적절한 신선한 배지와 공간이 주어지면 세포가 무한정으로 증식할 세포 배양물을 의미합니다. 세포 배양 및 세포주는 특정 세포의 생리학적, 병태생리학적 및 분화 과정을 연구하는데 중요한 역할을 합니다. 세포주 로부터 얻어진 형질전환 세포주 또는 암세포 한정 세포주이며, 단층 또는 현탁액 형태로 성장 될 수 있습니다. 이 세포는 12~14시간의 생성 시간으로 빠르게 분열하며 무기한 계대배양 할 가능성이 있습니다. 세포주 를 시험관 내 모델 로 유용하게 만드는 많은 이점이 있습니다. 첫째, 세포주는 균질한 세포 집단을 제공합니다. 둘째, 비교적 생육이 용이하고 허용 가능한 수의 계대를 통해 지속적으로 계대 배양하여 단기간에 많은 수의 세포를 제공할 수 있습니다. 정상세포와는 다르게 이러한 영구 세포주는 조작, 복제 및 무한정 전파할 수 있는 연속적이고 균일한 세포 소스를 제공합니다.

- Cell culture
재료와 방법은 다음과 같습니다. NIH-3T3(쥐 배아 세포, ATCC CRL-1658), HEK293T(인간 배아 신장 세포, ATCC CRL-1573), SH-SY5Y(인간 신경아세포종, ATCC CRL-2266) 및 3D4/2(포린 매크로파지)입니다. Dulbecco의 수정된 Eagle의 배지 (DMEM, HyClone, GELife Sciences, PA, 미국), 10% 태아 소 혈청 (FBS, HyClone, GE 생명 과학), PA, 미국), 100 U/mL 페니실린, 100 U/mL 스트렙토마이신, 2mM 글루타민입니다. (HyClone, GE 생명과학, PA, USA). 모든 세포 배양은 a에서 37℃로 유지되었습니다.

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