생명과학실험1 A+ 보고서 06. 정자 염색 및 운동성 관찰

소개

"생명과학실험1 A+ 보고서 06. 정자 염색 및 운동성 관찰"에 대한 내용입니다.

목차

1. 제목

2. 실험 날짜

3. 학과

4. 실험 목적

5. 재료

6. 방법

7. 결과
7-1. 정자의 운동성 관찰(100배율)
7-2. 첨체 관찰(400배율)

8. 고찰
1) Coomassie blue가 첨체에 염색되는 원리를 조사한다.
2) Coomassie blue가 꼬리에 염색되는 원리를 조사한다.
3) 실험에서 고정 과정이 왜 필요한지 알아본다.
4) 실험 방법에서 Glycerol 용액을 왜 올리는지 알아본다.
5) 정소와 부정소에서의 정자 차이(mobility, structure 면에서)를 조사한다.
6) 염색 후 관찰에서 정소, 부정소에서 왜 같은 결과가 나오는지를 조사한다.

9. 참고문헌

본문내용

1. 제목: 정자 염색 및 운동성 관찰
2. 실험 날짜: 2021. 04. 29 (목)
3. 학과: 화학생명환경과학부/ 학번: 2021110886/ 이름: 윤**/ 분반: 3

4. 실험 목적
정소와 부정소의 기능 및 차이점을 이해하고, 첨체 반응에 대해 학습한다.
① 정소와 부정소의 기능 및 차이를 이해한다.
② 정자의 형성 과정 및 구조를 이해한다.
③ 첨체 반응의 원리는 이해한다.

5. 재료
수컷 생쥐(정소와 부정소), 페트리 접시, 해부기, 10% NBF, e-tube, micro pipette, tip, PBS, Coomassie blue 용액(50% methanol, 10% acetate acid, 2차 증류수, Coomassie blue powder), 원심분리기, 슬라이드 글라스, 커버 글라스, 3차 증류수, 배양액, 광학현미경, 70% ethanol

<중 략>

8. 고찰
① Coomassie blue가 첨체에 염색되는 원리를 조사한다.
Coomassie blue는 단백질을 염색한다. 정자의 머리 전면에는 난자의 투명대와의 결합을 위해 효소와 다른 단백질을 막으로 둘러싼 구조인 첨체가 있다. 그리고 난자의 단당백질 막을 분해하기 위한 효소로는 아크로신, 히알루로니다아제 등 다양한 효소가 있으며 우리 몸에서 가장 작은 단백질인 인슐린도 51개의 아미노산으로 이루어졌기에 첨체는 굉장한 단백질 복합체라고 볼 수 있다. 그리고 정자의 머리에서 뻗어나오는 첨체돌기도 첨체 내용물로부터 액틴 단백질의 중합으로 생성되었다. 따라서 첨체가 염색되는 이유는 많은 단백질 때문이다.
Coomassie blue의 염색은 단백질의 아미노기 및 카르복실기와 정전기적이지만 비공유결합을 함으로 이루어진다. 염료 분자가 양모(케라틴)를 비롯한 단백질에 결합하면 단백질-염료 복합체를 형성하는데 이때 용액 중의 대부분의 분자가 양이온 형태로 존재할 때 산 조건 하에서도 청색을 생성하는 음전하를 띤 음이온 형태의 염료를 안정화시키며 그 결과 우리는 청색으로 염색된 시료를 볼 수 있다. 쿠마시 브릴리언트 블루 염료를 이용해 단백질을 염색하는 단백질 결정방법은 브래드포드(Bradford) 분석법의 기초라고 한다.

참고자료

· 고정, “알기쉬운 의학용어풀이집, 서울의대 교수 지제근”
· http://m.kmle.co.kr/search.php, 21-5-1
· David Hillis외 3인,「principles of Life」, 권혁빈 외 4명, ㈜라이프사이언스, 2014, p45-47, 505, 506
· 신삼식, 「인체 해부 교육에서 에탄올-글리세린 방부처리 시신의 유용성」, 2016, 초록
· Coomassie brilliant blue, “지식백과”
· https://terms.naver.com/entry.naver?docId=2694214&cid=60261&categoryId=60261, 21-5-1
· 글리세롤, “위키피디아”
· https://ko.wikipedia.org/wiki/%EA%B8%80%EB%A6%AC%EC%84%B8%EB%A1%A4, 21-5-1
· 이석희, 「부정소에서의 정자성숙 과정 중 수반되는 정자단백질 변화 양상의 포로티옴분석 및 정자성숙에 영향을 미치는 부정소인자 aquaporin의 발현양상 분석」, 2009, 초록
· Mounting과 4 % paraformaldehyde(10 % NBF용액), “BRIC"
· https://www.ibric.org/myboard/read.php?Board=exp_qna&id=47438&ksr=1&FindText=glycerol%20mounting, 21-5-3
· coomassie blue, “위키백과”
· https://ko.wikipedia.org/wiki/%EC%BF%A0%EB%A7%88%EC%8B%9C_%EB%B8%8C%EB%A6%B4%EB%A6%AC%EC%96%B8%ED%8A%B8_%EB%B8%94%EB%A3%A8, 21-5-2