이화여자대학교 생명과학실험1 레포트 모음

소개

2021년 1학기 생명과학실험1 수업 실험 레포트 모음입니다.
총 7개의 레포트입니다.
각각 점수 목차에 첨부했습니다.
제가 결석을 많이 해서 학점은 A0 받았습니다.
*실험 수업은 출석 중요해요ㅠㅠ 비대면일 때 강의 미리미리 재생하세요...

목차

1. 단백질 정제실험
2. SDS-PAGE(
3. Protein Electro-transfer & Western Blot
4. LDS Assay
5. Immunoprecipitation
6. UCSC genome browser를 활용한 유전체/유전자 데이터 마이닝
7. NCBI의 유전자 서열 분석 및 단백질 3차원 구조 모델링

본문내용

제목 - 단백질 정제실험
1. 실험 목적
Affinity chromatography 를 통한 단백질 정제과정을 이해한다.
2. 배경지식
I. 단백질의 정제
세포질 내의 단백질이 포함된 용해물(lysate: 원래 세포 내에 있던 물질들이 함유되어 있는 액체)을 얻기 위해서는 세포의 파쇄가 있어야 한다. 그 후 정제하고자 하는 단백질만의 분리하기 위해 chromatography 를 진행한다.
II. Affinity chromatography
Protein 과 ligand 사이의 친화도를 이용한 기법이다. 즉, 정제하고자 하는 단백질과 특이적으로 결합하는 ligand 를 넣어 단백질을 분리해낸다.
3. 실험원리
I. 재조합 단백질(Naa30)의 발현
E.coli plasmid pET28a vector 에 Naa30 gene 을 cloning 한 후 E.coli 를 배양한다. 배양 후 E.coli 세포를 파쇄해서 lysate 를 얻는다.
II. pET28a vector
⚫ f1 Ori - origin application 복제의 시작점
⚫ KanR – Kanamycin 항생제에 대한 저항성을 가진다.
⚫ His tag – Histidine 이 6 개있는 단백질에 붙어 있는 tag 로 Ni 과 결합을 통해 affinity chromatography 시 사용된다.
⚫ MCS – multiple cloning site 해당 부위의 유전자를 자르고 원하는 유전자를 넣는다.
⚫ RBS – Ribosome Binding Site, Ribosome 이 처음 붙기 시작하는 서열

참고자료

· 없음