제한효소를 이용한 Restriction of DNA 결과레포트 [A+]

목차

1. Abstract

2. Experiment
1) 실험 기기
2) 실험 시약
3) 실험 방법

3. Result

4. Discussion

본문내용

1. Abstract
이번 실험은 제한 효소를 이용해 DNA를 자르고, 잘린 DNA 단편의 크기를 아가로스 겔 전기영동을 통해 측정하고 분석하는 실험이다. 이번 실험에 사용한 플라스미드 DNA는 유전자 재조합된 pET-22b(+)이고, 사용한 제한효소의 종류는 EcoR Ⅰ, Nde Ⅰ, Xho Ⅰ 3가지이다. 각 조마다 다른 종류의 제한효소를 사용했기 때문에 다르게 나온 결과를 모두 분석하고, 이론적인 크기와 다르게 나온 조의 결과에 대해서 그 원인을 고찰하고 오차를 발생시킬 수 있는 스타활성의 발생 이유에 대해서 알아보았다. 또한 점착성 말단과 비점착성 말단의 차이점과 제한효소의 절단원리에 대해 알아보았다.

2. Experiment
1) 실험 기기
(1) Incubator (항온기)
- 세균을 배양하기 위한 목적으로 사용되며, 배양에 적합한 최적 온도를 유지해주는 기구이다.

(2) UV transilluminator
- TLC 또는 electrophoresis 실험에 있어서 cell의 검출 목적 등에 이용되며, 특정 파장의 UV를 조사하여 형광을 일으키므로 투명성과 UV intensity가 탁월하기 때문에 electro-
phoresis 실험 시 미량의 DNA도 검출할 수 있다. 이번 실험에서는 전기영동한 DNA를 눈으로 보기 위한 UV 조사 장치이다.

(3) 전기영동장치 (Electrophoresis apparatus) & Electrophoresis agarose
- 전기영동을 하는 기기로, DNA의 크기가 클수록 느리게 이동하게 되고, 전기장의 방향 또한 이동속도에 영향을 미친다. Agarose gel에 시료를 넣고 전류를 흘려보내면 인산기로 인해 (-)전하를 띄는 DNA는 양극 (+)쪽으로 끌려가게 된다. 이 때 DNA가 통과하는 Agarose gel은 다당류, 다공성 물질이기 때문에 생체 물질을 분리하는 여과제로 작용해 크기가 작은 DNA 조각이 더 빠르게 이동할 수 있게 된다.

참고자료

· 미생물 실험서/ 유민, 김병오, 이혜영 공저/ p.68-75