그람염색 실험보고서

목차

1. 실험제목

2. 실험목적

3. 실험도구

4. 실험방법

5. 실험이론
5-1. 그람염색법(Gram Staining)
5-2. 그람 양성세균과 그람 음성세균
5-3. 펩티도글리칸

6. 결과

7. 고찰

본문내용

1. 실험제목 : 그람염색(Gram Staining)

2. 실험목적 : 각종 균을 염색하여 현미경적으로 관찰함으로써 감염질환의 조기진단에 이용되는 그람염색법에 대해 이해할 수 있다.

3. 실험도구 : crystal violet, Safranin, 아이오딘, 95% 에탄올, 슬라이드글라스, DW(증류수), 그람 양성균(방선균), 그람 음성균, 알코올 램프

4. 실험방법 : 그람염색법을 이용한 그람양성균과 그람음성균의 염색
➀ Slide glass를 알코올램프 불꽃에서 잠깐 동안 가열시켜서 유막을 제거한다.
➁ Slide glass 위에 DW(증류수)를 1-2방울 떨어뜨린다.
➂ 배양 중인 세균을 이쑤시개를 이용해 증류수에 넓게 편다.
➃ 완전히 건조가 되면 Crystal violet으로 1분 동안 염색한 후 증류수로 세척한다. 이때 세척을 너무 강하게 하면 그람양성세균 또한 염색이 되지 않기 때문에 주의한다.
➄ Iodine으로 1분 동안 처리한 후 증류수로 세척한다. 아이오딘은 독성이 있기 때문에 조심해서 다루어야 한다.
➅ 95% Ethanol로 7초간 처리 탈색하고 증류수로 세척한다. 탈색을 오래할 시 그람양성세균 또한 탈색이 되기 때문에 유의해야한다.
➆ Safranin으로 1분 동안 염색하고 증류수로 세척한다.
➇ 공기 중에서 건조하여 현미경으로 관찰한다.

5. 실험이론
5-1. 그람염색법(Gram Staining) : 그람염색법이란 각종 균을 염색하여 현미경적으로 관찰하며, 감염질환의 조기 진단에 이용되는 방법이다. 1884년 덴마크의 세균학자인 Hans Chirstian Gram에 의해 처음 개발되었다. 그람염색법은 그림 1과 같이 염색, 착색(매염), 탈색, 대조염색 총 4단계의 과정을 거친다. 첫 번째로 crystal violet를 이용한 염색단계를 거친다. 보라색의 염기성 색소인 crystal violet으로 세균을 염색하면 그람 음성균과 그람 양성균 모두 보라색으로 염색된다.

참고자료

· Lisa A. Urry/캠벨 생명과학포커스 2판/2017/(주)바이오사이언스출판/p. 478-479, 488-489.
· 그람음성균/네이버지식백과-그람음성균/https://terms.naver.com/entry.nhn?docId=1068862&cid=40942&categoryId=32333
· 그람양성균/네이버지식백과-미생물학백과/https://terms.naver.com/entry.nhn?docId=5144715&cid=61232&categoryId=61232
· 펩티도글리칸[peptidoglycan]/네이버지식백과-생화학백과/https://terms.naver.com/entry.nhn?docId=5733554&cid=60266&categoryId=60266
· 그람염색이란 무엇인가?/네이버지식백과-건강백과/https://terms.naver.com/entry.nhn?docId=2833966&cid=55649&categoryId=55649
· 세균염색법/네이버지식백과-식품과학기술대사전/https://terms.naver.com/entry.nhn?docId=294480&cid=60262&categoryId=60262