일반생물학 및 실험 단백질의 검출

소개

일반생물학 및 실험 단백질의 검출 실험 레포트

목차

I. 실험목적(Purpose of experiment)
II. 배경지식(Background knowledge)
III. 가설설정(Setting up hypothesis)
IV. 실험(Experiment)
V. 결과(Results)
VI. 고찰(Discussion)
VII. 인용문헌(Literature cited)

본문내용

2. 실험 방법(Methods)
실험 전 주의사항
1. 스포이드는 지정된 시약만 사용
2. 시험관 벽에 스포이드 끝이 닿지 않도록 주의
3. 시험관은 조별 사용 후 깨끗하게 세척 후 조별 시험관대에 거치
4. 중탕기(water bath) 작동 시 주의

2-1. 뷰렛 반응(Biuret reaction)
1. 4개의 시험관에 1% albumin, starch, histidine, 유유를 각각 3ml씩 넣고, 같은 양의
10% NaOH(3ml씩)를 첨가하여 충분히 섞는다.
2. 여기에 0.5% CuSO₄를 한 방울씩 떨어뜨리면서 잘 흔들어 섞는다(황산구리를 너무 많이 첨가하면 수산화동의 황색 침전이 생겨 정확한 실험을 할 수 없다).
3. 이때 나타난 색을 관찰한다.

<중 략>

Ⅵ. 고찰(Discussion)
이번 실험은 뷰렛 반응과 닌히드린 반응을 통해 단백질을 검출해내는 것이 목적이다. 뷰렛용액 속에는 2개의 구리 이온이 들어있어 푸른색을 띠는데, 이 시약의 2가의 구리이온이 단백질의 펩티드 결합과 반응하여 보라색의 착화합물을 생성하기 때문에 시약과 단백질이 만날 때 보라색으로 변하는 성질을 이용하여 단백질을 검출한다. 닌히드린의 경우 아미노산수용액에 닌히드린을 첨가하면 청자색으로 변하는 발색반응을 이용한 것으로 색깔이 바뀌는 이유는 아미노기가 부착된 화합물과 닌히드린이 반응하면 닌히드린 2분자가 축합하여 아미노산의 종류에 따른 특유한 색을 나타낸다. 히스티딘이 청색을 띠는 것도 이러한 원리이다.
뷰렛 반응에서 starch는 탄수화물이기 때문에 색깔이 변하지 않으며 히스티딘의 색도 변하지 않는다. 왜냐하면 뷰렛시약은 단백질의 펩티드 결합 부위를 인식하기 때문에 하나의 아미노산과는 반응할 수 없기 때문이다. 따라서 뷰렛 반응은 우유, 알부민의 펩티드 결합과 반응하여 양성을 띤다. 닌히드린은 아미노산, 단백질의 알파 아미노산과 반응하기 때문에 아미노산, 단백질을 구분하지 않고 반응한다.

참고자료

· 오병운, 최수영, 조성진, 류호진, 김경환, 박종석 저. 2015. 핵심 일반생물학실험서 : 생물학 및 실험 I & II. (주)바이오사이언스출판. 서울. 5-11
· 네이버 지식백과. 뷰렛 반응. April 2, 2021. from
· https://terms.naver.com/entry.naver?docId=1105203&cid=40942&categoryId=32279
· 사이언스올. 닌히드린 반응. April 2, 2021. from
· https://www.scienceall.com/%EB%8B%8C%ED%9E%88%EB%93%9C%EB%A6%B0%EB%B0%98%EC%9D%91ninhydrin-reaction/
· 네이버 블로그. 단백질 정량UV법. April 2, 2021. from
· https://m.blog.naver.com/PostView.nhn?blogId=drugum&logNo=220044956721&proxyReferer=https:%2F%2Fwww.google.com%2F