분자유전학실험레포트(A+)_Genomic DNA Extraction and Insert Generation. 당근잎(Daucus carota)에서 추출한 genomic DNA와 GDNA 전기영동결과(사진有), 추출한 식물의 유전체 DNA의 이용 방안, 특이적 band가 나타나지 않거나 비 특이적 band가 다수 나타난 경우에서의 실험 수정.

소개

"분자유전학실험레포트(A+)_Genomic DNA Extraction and Insert Generation. 당근잎(Daucus carota)에서 추출한 genomic DNA와 GDNA 전기영동결과(사진有), 추출한 식물의 유전체 DNA의 이용 방안, 특이적 band가 나타나지 않거나 비 특이적 band가 다수 나타난 경우에서의 실험 수정."에 대한 내용입니다.

목차

Ⅰ. Abstract

Ⅱ. Introduction
1. Plant genomic DNA extraction
2. DcHsp17.7 gene
3. Insert generation by PCR (Polymerase Chain Reaction)

Ⅲ. Materials, Chemical Reagent & Apparatus
1. Plant genomic DNA extraction
2. PCR (Polymerase Chain Reaction)

Ⅳ. Methods
1. Plant genomic DNA extraction
2. Polymerase Chain Reaction

Ⅴ. Results

Ⅵ. Discussion
1. 결과분석
2-1. 추출한 식물의 유전체 DNA의 이용
2-2. 대장균(Escherichia coli), 초파리(Drosophilla melanogaster), 애기장대(Arabidopsis thaliana)의 유전체 크기
3. PCR을 수행한 결과 특이적 band가 나타나지 않거나 비 특이적 band가 다수 나타난 경우에서의 실험 수정.

본문내용

Ⅰ. Abstract
식물유전체의 DNA 연구는 다양한 분야에서 많이 이용되고 있으며, 현재 많은 식물의 유전체가 밝혀지고 있다. 본 실험을 통해 식물의 genomic DNA를 추출하고 열 충격 단백질을 발현하는 DcHsp17.7유전자를 PCR 후 전기영동하여 해당 DNA의 크기를 알아보려한다. Daucus carota의 잎을 이용하여 실험을 진행하였으며 PCR과정에서는 10X reaction buffer, dNTP, Taq DNA 중합효소를 사용하였다. 액체질소로 당근 잎의 조직을 부순 다음 DNA 추출용액에 넣어 핵산을 추출한다. 5개조 중에서 3개조에는 RNase를 넣었고 나머지 3개조에는 RNase대신 D.W를 넣어 진행하였다. DNA 전기영동 결과 모든 조에서 10,000bp 이상에서 band가 형성되었고 RNase를 넣지 않은 4,5조에서는 추가로 250bp부터 위쪽으로 smear현상이 나타났다. PCR 후 전기영동 결과 1조에서는 band가 전혀 나타나지 않았고 2,3조는 500bp와 250bp 아래 부분에서 band가 하나씩 나타났으며 4,5조는 2,3조와 결과가 비슷하나 추가로 smear현상이 나타났다. 실험 결과 D. carota의 genomic DNA의 대략적 크기는 10,000bp이고 DcHsp17.7유전자의 서열 크기는 500bp로 보여 진다. 식물유전체의 연구를 통해 DcHsp17.7와 같은 인간에게도 필수적인 유전자 서열이 밝혀질 것으로 보이며 적은 양의 DNA 샘플로도 PCR과정을 거쳐 유전자 연구에 이용할 수 있을 것으로 생각된다.

Ⅱ. Introduction
1. Plant genomic DNA extraction
식물의 유전체 DNA는 서던블롯분석법 (Southern blot analysis), 유전체 도서관(genomic library) 제작 및 유전체 PCR (genomic PCR) 등에 필수적으로 사용된다. 지금까지 식물체에서 DNA를 분리하는 여러 방법들이 개발되었는데, 식물체에서 DNA를 분리하는 과정은 기본적으로 1) 식물체 분쇄, 2) 세포 용해(cell lysis), 3) 용해된 세포에서의 DNA 추출 등의 단계로 이루어진다.

참고자료

· 없음