일반생물학실험1 _ DNA cloning - 제한효소를 이용한 DNA 절단 및 분석 (A+)

소개

2018-1 일반생물학실험1 과목
A+ 실험보고서

목차

1. Introduction
1) 실험목적
2) 이론 배경

2. Methods& Materials
1) 실험재료
2) 실험방법

3. Results

4. Discussions

본문내용

A. Introduction
1. 실험목적
(1) 재조합 DNA 제작에 필요한 가장 기본적인 실험재료인 제한효소에 대해 알아보고 플스미드를 제한효소로 직접 잘라본다.
(2) 플라스미드가 제한효소에 의해 제대로 잘렸는지 아가로즈 젤 전기영동으로 확인한다.
(3) 본 실험에서는 플라스미드 벡터를 사용하는데, 이 플라스미드에는 EcoR1, Not1에 의해 어떤 유전자 DNA 절편 (insert라고도 하며 약 400b)이 들어가 있다.
2. 이론 배경
1) subcloning
연구하고자 하는 유전자 DNA 절편(Target DNA)을 plasmid vector에 넣는 방법으로, vector에 삽입된 DNA 절편을 보관하고 증폭할 수 있으며 여러 가지 조작을 가할 수 있다.
Vector에는 promoter, Multiple Cloning Site(MCS), selection marker의 부분이 존재한다. Promoter는 RNA 중합효소가 결합하는 부위이다. Multiple Cloning Site(MCS)는 여러가지 restriction site가존재하는 부분으로, DNA segment가 plasmid에 삽입될 수 있도록 한다. Selection marker는 antibiotic resistance를 갖는 gene으로 vector에 인위적으로 삽입한 후 형질 발현여부를 관찰하여 target gene이 삽입된 개체를 선별하는 장치이다.

참고자료

· 정주혜 외 4명, 『고등학교 생명과학 실험』, 서울특별시교육청, 2013.
· 「6X DNA Loading Dye (Triple Dye) (DR04005)」, 『NanoBT』,
· https://blog.naver.com/nanobt/220413823173
· 「제한효소」, 『人CoDOM』,
· http://www.incodom.kr/%EC%A0%9C%ED%95%9C%ED%9A%A8%EC%86%8C
· 「DNA structure」, 『Chemistry dictionary』, <https://chemdictionary.org/dna-structure/>