[생명과학실험] PCR & Agarose gel 전기영동

소개

직접 실험을 통해 작성한 보고서로 높은 점수를 받았습니다.
경우에 따라 실험 재료나 실험 방법이 다를 수 있습니다.
어디까지나 이 보고서는 참고용으로 사용하시기 바랍니다.

목차

1. 실험제목

2. 실험목적

3. 실험도구

4. 실험방법

5. 실험이론
1) DNA의 복제
2) PCR
3) Agarose gel 전기영동

6. 결과

7. 고찰

8. 참고문헌

본문내용

4. 실험방법
1) 중합효소연쇄반응(PCR) 실험 방법
① PCR을 진행하기 위해 PCR 재료(reagent)들을 준비한다.
② PCR tube에 재료들을 혼합하여 잘 섞어준다.
③ PCR 기계에 94℃로 2분, 변성 단계는 94℃로 20초, 결합 단계는 62℃로 10초, 신장 단계는 72℃로 30초, 반응 이후는 72℃로 2분의 조건을 설정하여 PCR을 진행시킨다.
2) Agarose gel 전기영동 실험 방법
① 삼각플라스크에 2g의 agarose와 100mL의 TAE buffer를 넣어준다.
② Agarose가 완전히 녹을 때까지 전자레인지를 이용해 2~3분간 가열한다.
③ 굳지 않을 정도로 식힌 후 Red Safe 5μL를 넣고 잘 섞는다.
④ Gel tray에 용액을 부은 후 comb를 꽂고 약 20분 동안 굳힌다.
⑤ 완전히 굳은 gel에서 comb를 제거하고, 전기영동 탱크에 넣은 후 TAE buffer를 붓는다.
⑥ PCR 결과물에 DNA loading dye 4μL를 넣고 잘 섞어준다.
⑦ DNA marker와 PCR 결과물을 gel의 홈에 조심스럽게 넣어준다.
⑧ Voltage를 주어 20분간 전기영동을 한 후 gel을 꺼내 UV 조사기를 통해 밴드를 확인한다.

5. 실험이론
5-1. DNA의 복제 - 반보존적 복제 모델
DNA의 서로 마주보는 두 가닥은 서로 상보적이고 각각의 DNA 가닥은 상보적인 가닥을 다시 만들어 낼 수 있는 정보를 포함하고 있다. 세포가 DNA를 복제할 때 각 가닥은 뉴클레오타이드를 배열하여 새로운 상보적 가닥을 만드는 데 있어서 주형의 역할을 한다. 뉴클레오타이드는 염기쌍 형성규칙에 의해 주형가닥에 나란하게 늘어서고, 이 뉴클레오타이드들이 연결되어 새로운 가닥을 이룬다. 결과적으로 1개의 이중가닥 DNA 분자가 ‘양친’ 분자의 정확한 복제본인 2개의 DNA 분자가 된다.

참고자료

· Lisa A. Urry, 캠벨 생명과학 포커스, 2판, 전상학, 2017, 바이오사이언스출판, 260, 272~273쪽