[A+ 영양생화학및실험 레포트] 지질과산화 측정 (TBA반응, 단백질의 지질과산화농도 구하기)

소개

[A+ 영양생화학및실험 레포트]

담당교수님께 최우수레포트로 평가받은 식품영양학과 영양생화학및실험 레포트입니다.
문헌을 꼼꼼히 찾고 자료를 적절히 첨부하였기 때문에 레포트 작성에 좋은 참고가 될 수 있습니다.

목차

1. 실험제목

2. 실험날짜

3. 실험목적

4. 실험요약

5. 실험원리
1) 지질의 과산화
2) 티오바르비투르산 시험 (thiobarbituric acid test)
3) 비색법
4) 흡광도와 표준곡선(standard curve)

6. 실험기구 및 시약
1) 기구
2) 시약

7. 실험방법
1) 간 균질액 준비
2) 지질과산화 측정

8. 실험결과

9. 고찰

본문내용

1. 실험제목: 지질과산화 측정

2. 실험날짜: 2016년

3. 실험목적: TBA반응의 원리를 이해하고, 이 방법을 이용하여 단백질 1ml의 지질과산화농도를 구한다.

4. 실험요약
이번 실험은 TBA반응의 원리를 이해하고, 단백질 1ml의 지질과산화농도를 구하는 실험이다. 지질의 과산화는 지질의 지방산부분이 과산화한 상태를 의미하며, 검출은 TBA반응 등에 의해 이루어진다. TBA반응의 2-thiobarbituric acid는 지방산의 산화 생성물과 반응하여 붉은 색소를 형성하고 이 발색정도를 비색 정량하여 유지 산패 정도를 알 수 있다. 시험관 1~7까지는 표준시약, 8~10은 희석된 간 균질액을 이용하여 샘플을 제작하였으며, 분광광도계로 흡광도를 측정하였다. 그러나 표준시약의 흡광도 값이 좋지 않아, 다른 표준 값을 이용했다. 간 균질액의 흡광도 값들은 재현성이 좋았으며 그 평균 값은 0.0376으로, 표준곡선에 대입하자 농도는 0.451였다. 따라서 간의 지질과산화농도는 농도와 양에 따라 이 값에 20배를 하여 9.02μM/ml가 나왔으며, 단백질 농도로 나누어 471nmol/mg라는 단백질 1ml의 지질과산화 농도를 구할 수 있었다. 이번 실험에서 표준시약의 흡광도 측정 결과가 좋지 못해 아쉬웠고, 생화학 실험에서의 마이크로피펫팅의 매우 큰 중요성을 알게되었다.

5. 실험원리

지질의 과산화
과산화 지질이란 과산화 상태의 지질을 말한다. 실제로 과산화하고 있는 것은 지질의 지방산부분이며, 과수산기구조를 하는 것, 내부과산화구조를 하는 것, 과수산기라디칼구조를 하는 것, 경우에 따라서는 이들의 분해산물까지 이 영역에 포함시키기도 한다. 고도불포화지방산을 기질로 하여 동물 및 식물의 효소, 혹은 비효소적으로 자동산화에 의해 형성된다. 과수산기구조는 일반적으로 불안정하고, 자주 라디칼개열을 일으켜서 ―O·, ―O―O· 라디칼이 생긴다.

참고자료

· 없음