HPLC high performance liquid chromatography 건국대학교 유기화학실험

소개글

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목차

1. 서론
1.1 실험 목적
1.2 실험 이론

2. 실험 방법
2.1 기구 및 시약
2.2 HPLC

3. 실험 결과 및 고찰

4. 참고 문헌

본문내용

1.1 실험 목적
농도를 알고 있는 표준용액을 HPLC하고, 그 면적 값을 이용하여 선형방정식을 구한 뒤, 이를 바탕으로 미지시료의 농도를 구해본다.

1.2 실험 이론
1) HPLC
기존의 칼럼 크로마토그래피는 불균일 고정상과 중력을 이용하여 시료를 분리하기 때문에 분석하는데 걸리는 시간이 길고 효율이 좋지 못 한 단점이 있다. 따라서 이러한 단점을 보완하여 불균일 고정상 대신 5~30m 정도의 입자가 균일한 다공성 충전제를 채우고 액체의 이동상에 높은 압력(약 2000psi)을 걸어 고속(1~2mL/min) 고성능 분리가 가능해진 크로마토그래피이다. 고속액체 크로마토그래피(HPLC)는 휘발성이 문제가 되지 않으므로 분자량이 큰 물질의 분석에도 사용될 수 있다. 또한 분리가 빠르기 때문에 '고속 액체 크로마토그래피(high speed liquid chromatography)'라고도 한다. HPLC는 분리 메커니즘에 따라서 흡착, 분배, 혹은 흡수, 이온 교환, 크기 배제, 친화 방식의 5가지로 구분될 수 있다.

HPLC 기기는 크게 두 가지 분리, 검출 부분으로 구분된다. HPLC의 분리 부분은 칼럼, 주입 장치 및 이동상 전달 장치로 되어있다. 이동상 전달 장치는 여과펌프, 탈기체 장치와 연결관으로 되어 있다. 만약 기울기 용리(gradient elution, 구배 용리)를 하려면 혼합기가 필요하다. 검출 장치는 검출기와 신호 출력 장치로 되어 있고 검출기로서 자외선-가시광선(UV-Vis), 굴절률(RI)과 전기화학적 검출기(ECD)들이 가장 널리 사용된다.
분석용 HPLC에서 이동상은 칼럼을 통해 1~5mL./min의 흐름 속도가 되게 펌프질한다. 이동상의 용매 조성을 일정하게 해서 사용하는 방법을 등용매 용리라고 한다. 반면에 이동상의 용매 조성이 분석하는 동안 미리 정해진 프로그램대로 연속적으로 변화시키는 방법을 기울기 용리(gradient elution)라고 한다.
기울기 용리법은 GC에서 칼럼 온도 프로그램법에서 얻어지는 효과와 같다. 그래서 등용매 방식에서 단일 용매 또는 혼합 용매로 분리능이 떨어지는 경우에 기울기 용리법이 사용된다.

참고 자료

polarity index table Research gate (2020/11/29)
https://www.researchgate.net/figure/Etching-rate-polarity-and-PDMS-swelling-index-of-different-solvents-The-etching-rate_tbl1_281672163
MSDS화학물질정보, 안전보건공단(http://msds.kosha.or.kr/) Methanol, Benzene, Toluene (2020/11/29)
위키피디아 – HPLC
https://ko.wikipedia.org/wiki/HPLC (2020/11/29)