T-vector와 insert DNA 비율을 달리하여 TA cloning을 통해 얻어진 colony 비교 분석

최초 등록일
2020.09.22
최종 저작일
2020.09
8페이지/워드파일 MS 워드
가격 1,800원 할인쿠폰받기
판매자백구사랑 (본인인증회원) 2회 판매
다운로드
장바구니
자격시험 이용후기 이벤트

소개글

"T-vector와 insert DNA 비율을 달리하여 TA cloning을 통해 얻어진 colony 비교 분석"에 대한 내용입니다.

목차

1. Subject
2. Object
3. Introduction
4. Material & Method
5. Result
6. Discussion

본문내용

1. Subject : recombinant plasmid DNA cloning

2. Object: T-vector와 insert DNA 비율을 달리하여 TA cloning을 통해 얻어진 colony를 비교 분석해본다.

3. Introduction
TA cloning : 보통 PCR product는 3’ 말단이 blunt end로 되어 있는 줄 알지만 그렇지 않은 경우가 많다. 특히 PCR에 사용하는 polymerase는 Thermus aquaticus (Taq) polymerase를 많이 사용하는데, Taq polymerase는 Terminal deoxynucleotidyl transferase로서 Extension이 끝날때 3’말단에 nucleotide A를 더 붙이고 끝이 나는 특성을 가지고 있다. 단 단지 한 개의 A만을 붙이고 끝이 나기 때문에 DNA를 cloning을 하고 싶다면 vector의 5’ 말단이 T로 끝나는 vector를 사용하면 되고 그렇기에 이 cloning이 TA cloning이라고 불리는 것이다.
T-vector를 만드는 방법은 어떠한 vector에 상관없이 blunt end를 만드는 제한효소를 처리한 후 전기영동을 한 후 gel purifiction을 하고 이 product 5ul에 dTTP 2mM(final), 10X Taq buffer, Taq polymerase(5unit)를 넣고 70℃ 2시간 PCR한다음 PCR product를 정제한 후 사용한다고 한다.
이러한 T-vector를 이용하는 이유는 여러가지가 있을 수 있는데 우선 PCR product양이 너무 적을 경우 cloning을 위한 PCR반응 산물이 너무 적을 경우 제한효소 처리 및 DNA추출 과정에 따른 insert DNA 농도가 줄게 됨에 따라 vector에 삽입 할때 부담이 크다. 그렇다고 PCR reaction cycle수를 늘리면 중간에 mutation이 발생할 우려가 있다.

참고 자료

Zhou,M.Y., Clark,S.E. and Gomez-Sanchez, C.E.(1995)
Universal cloning method by TA strategy. BioTechniques 19,34.
https://m.ibric.org/miniboard/read.php?Board=exp_qna&id=83556
https://www.sciencedirect.com/science/article/abs/pii/S0168165602001074

자료문의

ㆍ이 자료에 대해 궁금한 점을 판매자에게 직접 문의 하실 수 있습니다.
ㆍ상업성 광고글, 욕설, 비방글, 내용 없는 글 등은 운영 방침에 따라 예고 없이 삭제될 수 있습니다.
ㆍ다운로드가 되지 않는 등 서비스 불편사항은 고객센터 1:1 문의하기를 이용해주세요.

판매자 정보

백구사랑
(본인인증회원)
회원 소개글이 없습니다.
판매지수
ㆍ판매 자료수
34
ㆍ전체 판매량
82
ㆍ최근 3개월 판매량
18
ㆍ자료후기 점수
받은후기없음
ㆍ자료문의 응답률
0%
판매자 정보
ㆍ학교정보
  • 비공개
ㆍ직장정보
  • 비공개
ㆍ자격증
  • 비공개
  • 위 정보 및 게시물 내용의 진실성에 대하여 해피캠퍼스는 보증하지 아니하며, 해당 정보 및 게시물 저작권과 기타 법적 책임은 자료 등록자에게 있습니다.
    위 정보 및 게시물 내용의 불법적 이용, 무단 전재·배포는 금지되어 있습니다.
    저작권침해, 명예훼손 등 분쟁요소 발견시 고객센터의 저작권침해 신고센터를 이용해 주시기 바랍니다.

    찾던 자료가 아닌가요?아래 자료들 중 찾던 자료가 있는지 확인해보세요

    더보기
    상세하단 배너
    우수 콘텐츠 서비스 품질인증 획득
    최근 본 자료더보기
    T-vector와 insert DNA 비율을 달리하여 TA cloning을 통해 얻어진 colony 비교 분석