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Enzyme activity assay A+ 실험레포트(결과, 이론)

전형적인공대생
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최초 등록일
2020.06.10
최종 저작일
2019.04
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목차

1. Abstract
2. Experiment
3. Result
4. Discussion
5. Reference

본문내용

이번 실험은 CalB(Candida antarctica lipase B)효소를 이용하여 pNPB(p-Nitrophenyl butyrate)를 분해하여 p-NP(p-Nitrophenol)의 생성물을 10분마다 UV-spectrometer를 이용하여 흡광도를 측정하여 농도변화를 구하고 공식에 대입하여 효소의 활성도를 알아보는 실험이었다. pNPB용액이 빛에 매우 민감한 광분해성을 띄기 때문에 이를 방지하기 위해 호일을 감싸 빛의 영향을 억제해주었다. 또한 자연적인 광분해 영향을 파악하기 위해 효소를 넣지 않은 대조군 또한 흡광도를 시간마다 측정하고 비교하였다. 생성물인 p-NP는 노란색을 띄었고, UV-spectrometer에서 405nm에서 흡광피크를 갖는다. 따라서 10분마다 4번씩 405nm에서의 흡광도 값을 측정하고 이를 통해 효소의 활성도를 계산하여 그래프로 나타내었다. CalB는 100배 희석하여 사용하였기 때문에 마지막에 환산인자를 곱해주었다.

참고 자료

Willey, Sherwood, Woolverton / 2016 / "미생물학 제9판“ / (주)라이프사이언스 / 137~172p, p358~371
Benjamin A. Pierce / 2017 / "유전학의 의해 개념과 원리 제 6판“ / (주)라이프사이언스 / p248~260
“생물화학공학 이론 및 실험노트” 4. Transformation
오계헌 외 4명 / 2010 / “최신 미생물학 실험 제 2판” / 신광문화사 / p210~220
유주현, 변유량 / 2007 / “응용미생물학실험” / 도서출판효일 / p211~250
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