전기 영동(electrophoresis) 법에 의한 시료분석, Quantification of protein with Bradford assay 실험레포트

소개

"전기 영동(electrophoresis) 법에 의한 시료분석, Quantification of protein with Bradford assay 실험레포트"에 대한 내용입니다.

목차

1. Title
2. Purpose
3. Introduction
4. Materials
5. Methods :
6.Results
7. Discussion
8. Project
9. Reference

본문내용

1. Title : 전기 영동(electrophoresis) 법에 의한 시료분석,
Quantification of protein with Bradford assay
4. Purpose : 1) 정제한 Recombinant Plasmid를 발현에 적합한 Cell에 Transformation 해준 뒤 원하는 단백질을 발현시키고 단백질 정제 과정을 거쳐 순수한 단백질을 얻어 낼 수 있고 SDS-PAGE를 통하여 Target 단백질이 잘 정제되었는지 확인한다.
2) 미지의 단백질 시료의 농도를 표준 단백질의 흡광도를 이용한 표준곡선을 이용해 알아내는 방법을 습득한다.
5. Introduction :
- 전기 영동(Gel electrophoresis)는 DNA나 단백질을 크기에 따라 분리하는 방법이다. 전기적 특성에 따른 분리를 한다. DNA는 인산기 때문에 음전하를 띠어 위와 같은 방식이 가능하다.
- Buffer solution에는 TAE와 TBE가 있으며 TAE는 비교적 크기가 큰 DNA에 사용하며 TBE는 비교적 크기가 작은 DNA에 사용한다.
- EtBr은 자외선을 받아 가시광선으로 파장을 변화시키는 일종의 형광물질로 전기 영동에서 핵산을 표지 한다.
- DNA loading dye는 well에 DNA를 넣어줄 때 DNA를 무겁게 하여 가라앉혀준다. 푸른빛을 띠면서 DNA가 전기 영동 된 정도를 알 수 있다.
- 전기영동의 속도는 DNA 분자의 크기가 클수록 느리게 이동하며 Agarose 농도가 높을수록 느리게 이동한다.

참고자료

· 네이버지식백과/ 정성분석/ 생명과학 대사전/ https://terms.naver.com/entry.nhn?docId=421900&cid=42411&categoryId=42411
· 위키백과/ Spectrophotometry/ https://en.wikipedia.org/wiki/Spectrophotometry (2018-06-12 방문)
· 위키백과/ Lowry protein assay/ https://en.wikipedia.org/wiki/Lowry_protein_assay
· 레닌저의 생화학/ 월드사이언스/윤경식, 김호식/ 2014/ p.80.