[기기 분석실험] HPLC를 이용한 물질 분리 예비레포트

소개

"[기기 분석실험] HPLC를 이용한 물질 분리 예비레포트"에 대한 내용입니다.

목차

1. 실험 목적
2. 실험 이론
3. 실험순서

본문내용

1. 실험 목적
고성능 액체 크로마토그래피(High Performance Liquid chromatography)로단백질 시료를 분리하여본다

2. 실험 이론

크로마토그래피의 어원.Tswett(1903)년이 식물의 색소를 분리하여 사용.오늘날은 색깔과 무관하게 화학물질을 분리하는하는기술의미한다.
크로마토그래피는 혼합물이 2가지상(이동상,고정상)분배에 의해 분리되는 물리적인방법이다.이동상의 예로는 가스크로마토그래피 또는 액체 크로마토그래피가 있다.크로마토그래피는 혼합물이 이동상의 영향하에서 정지상을 통과할 때 일련의 속도차이에 의한결과로 혼합물을 분리시키는 방법이다. K=Cs/Cm(분배계수)
Cs=정지상에서의 시료농도 Cm= 이동상에서의 시료농도
이때 분석하고자하는 대상물질의 특성(분자량,이온성,용해도 등)에 따라 컬럼을 선택한다음,적합한 이동상을 사용하여 시료를분리한다.분리된 시료는 시료에 대한 높은 감도,선택성을 가지며,적당한 밴드폭,낮은 검출한계등을 가지는 검출기를 선택하여 분석한다.
이중에서 고속 액체크로마토그래피는 액체 크로마토그래프의 일종으로 고압,또는 고성능 등으로 말하는경우도 있다,보통 액-액,액-고,이온교환 겔침투크로마토그래피4종류로 분류할수있다.이동상은 펌프에 의해 공급된다.시료도입부에는 여러가지 방식이 있어,시린지에 의한 주입법, 밸브나 루프등을 이용하는 방법 등이있다.물질의 분리는 분리,목정성분의 분리에 적당한 충전제를 채운 컬럼(보통 스테인레스스틸제)가 필요하다.컬럼의 크기는 분석 목적에따라 모세관형으로부터 통모양의 것까지 있고분취용에는 구경이나 길이가 상당히 큰것까지쓰이고있다.검출부에는 여러가지방식이있지만,일반적으로는 UV검출기, RI검출기등이있다.
검출된 결과는 recorder(기록계에의해 기록되고) ,그결과크로마토그램이 얻어진다.실제로 분석을 하는 경우에 가장 중요시되는 것은 분리와 검출에관한 부분이다.

참고자료

· 기기분석, 이대운 저, 대한교과서, 1998, p 465~495
· http://www.waters.com/waters/nav.htm?locale=ko_KR&cid=515198
· http://bint.kr/110004948712