서강대학교 현대생물학실험4 세포분획을 통한 미토콘드리아, 핵 관찰

소개

"서강대학교 현대생물학실험4 세포분획을 통한 미토콘드리아, 핵 관찰"에 대한 내용입니다.

목차

1. Abstract
2. Introduction
3. Material and Method
4. Data and Result
5. Discussion
6. Reference

본문내용

Abstract
이번에 진행한 실험에서는 쥐를 해부하여 간, 심장, 신장, 근육세포를 적출해 homogenization과 differential centrifugation을 진행하여 세포 분획을 했다. Cell fractionation을 통해서 세포소기관인 핵, 미토콘드리아를 추출한 뒤 핵은 methylene blue로, 미토콘드리아는 Janus green B로 염색한 뒤에 광학현미경으로 관찰했다.
mouse로부터 각기 다른 무게의 심장, 간, 신장, 근육세포를 적출한 뒤 심장, 간, 신장세포의 경우 샘플 무게의 3배 부피의 homogenizing buffer를, 근육세포의 경우 2배 부피의 homogenizing buffer를 넣은 뒤 homogenizer를 사용해 homogenization을 진행했다. 다음, 분획을 위해 differential centrifugation을 진행했는데, 1000g 조건에서 핵을 얻고, 10,000g 조건에서는 미토콘드리아를 분리했다. 심장, 신장, 간, 근육세포마다 핵과 미토콘드리아를 염색해 현미경으로 이를 관찰했으며, 조직마다 핵과 미토콘드리아의 양이 다르게 관찰되었다. 특히 근육조직의 경우, 타 조직에 비해서 미토콘드리아가 비교적 적게 관찰되었다.

Introduction
이번 실험에서는 세포소기관중에서 핵과 미토콘드리아를 관찰하였다. 핵은 세포의 유전자를 지니는 소기관으로, 유전자의 발현조절을 통해서 세포 기능을 조절한다. 핵의 구조는 lipid bilayer로 이루어지며 이 내부에는 DNA와 protein, 그리고 인이 포함된다. 이 중에서 DNA의 phosphate backbone은 negative charge를 지니고 있어 positive-charged dye인 methylene blue와 같은 염색약이 결합할 수 있다.
세포의 미토콘드리아의 경우 세포호흡을 통해 세포활동에 필수적인 에너지를 공급한다.

참고자료

· David L. Nelson, Michael M. Cox (2010), Principles of biochemistry, 5th ed, 월드사이언스, pp.186-197
· Geoffrey M. Cooper, Robert E. Hausman (2013), The Cell-A Molecular Approach, 6th ed, SINAUER, pp. 229-240
· James D. Watson (2014), 왓슨 분자생물학, 7판, 바이오사이언스 출판, pp. 321-323