단백직 전기영동

소개

"단백직 전기영동"에 대한 내용입니다.

목차

1. Background (실험 배경) - 본 실험에 필요한 기본 지식에 대한 조사
1) 전기영동
2) 단백질 정량
3) Coomassie blue staining

2. Purpose (실험 목적) - 본 실험을 하게 된 이유

3. Material (실험 재료 및 장비)

4. Methods (실험 방법)
1) Bradford assay
2) Sampling
3) SDS gel&loading
4) Comassie Blue Staining

5. Result

6. 결론

7. Discussion

본문내용

1. Background (실험 배경)
- 본 실험에 필요한 기본 지식에 대한 조사
1) 전기영동
: 전기영동이란 전해질 중에 존재하는 하전 입자에 직류전압을 걸면 정의하전입자는 음극으로, 부의하전 입자는 양극으로 향하여 이동한다. 이 현상을 전기영동이라고 한다. 또한 동일 방향으로 이동하는 하전 입자의 사이에서도 전기영동을 할 때 이동속도가 다른 성분은 점차 분리되어 간다. 이 기법은 용액 중에서의 이동이기 때문에 전기이동보다는 전기영동이라 이해하는 것이 합리적이다.
전기영동은 1807년 러시아의 물리학자 A.Reuss가 점토의 현탁액에 관해서 현상을 발견하고 1930년대에 스웨덴의 생화학자 A.W.K Tiselius에 의하여 이동계면 전기영동장치(Tiselius형 전기영동장치)가 개발되어 실용적인 기법으로 확립되었다. 이 장치는 혈정 단백질의 분석 등 단백질의 연구에 공헌 하였다. 그 이후 gel 전기영동이 등장하여 단백질이나 핵산의 분리. 단백질의 분자량 측정 등 생화학 분야에서 널리 이용되어 많은 변법이 나왔다.
전기영동은 분리 원리에 따라 등족 전기영동, 등전점 전기영동 등으로 나누어지고 지지체에 따라 여과지 전기영동, gel 전기영동 등, 분리의 장소의 형태에 따라 슬라브 전기영동, 디스크 전기영동, aahtp관 등으로 나누어지게 된다.
여러 전기영동 중에서 본 실험에서는 gel 전기영동인 SDS-page(Sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis)를 이용하였다. Sodium dodecyl sulfate 존재 하에 시행하는 polyacrylamide gel 전기영동을 말하며, U. K. Laemmli 이 개발한 농축 gel을 사용하는 방법을 널리 사용하고 있다. SDS는 음이온성 계면활성제인데, 단백질에 다량으로 결합하여 아미노산 곁사슬끼리의 상호작용을 방해하고 단백질을 사슬형태로 변성시켜 음전하를 띄게 하여 +charge로 끌려가게 하는 방법이다. 즉, 단백질을 크기별로 분리하는 방법 중 하나이다.

참고자료

· 한국생화학회 / 실험생화학/ 탐구탕 / P.53-64 ,P197-206
· 강영희, 생명과학대사전, 초판 2008., 개정판 2014., 도서출판 여초
· 화학용어사전편찬회, 화학용어사전, 2011. 1. 15., 일진사
· 한국식품과학회, 식품과학기술대사전, 2008. 4. 10., 광일문화사
· 간호학대사전, 1996. 3. 1., 한국사전연구사
· 부성희, 생화학 실험, 2015, 청문각
· 관한식, 생화학 8판, 2015, 라이프 사이언스 48p~54p, 107p