예비1 Miniprep 5조 김

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목차

1. 실험 목적

2. 바탕 이론
1) DNA
2) Plasmid 분리법
3) 알코올 침점법
4) 전기 영동법

3. 기구 및 시약

4. 실험 방법

5. 참고 문헌

본문내용

1. 실험 목적
일반적인 세균의 경우, 염색체 DNA와 플라스미드 DNA(Plasmid DNA)로 구성되어 있다. 이때, 플라스미 DNA는 염색체 DNA와는 별도로 자가 복제가 가능하지만 실제로 염색체 DNA와 물리적 특성이 유사하여 구부하는데 어려움이 있다. 가장 두드러지는 특성은 염색체 DNA는 선상(linear form)을 가지는 반면 플라스미드 DNA는 작은 환상형 이중 가닥 DNA (Circular double-stranded DNA)의 특성을 가지고 있어, DNA의 분자 크기에 대하여 상대적인 크기를 가지고 있다. 본 실험은 이러한 특성을 활용하여 가장 보편적인 플라스미드 DNA 분리법인 Miniprep의 방법 중 Alkaline Lysis법을 이용하여 E.coli 세포로부터 해당 DNA를 추출한다. 실험 과정에서 순차적으로 S1 buffer, S2 buffer, S3 buffer, PW buffer, EB buffer을 활용하여 플라스미드 DNA를 추출하고, 이를 최종적으로 전기 영동법을 활용하여 추출한 플라스미드 DNA의 크기를 확인하고, 구조를 파악한다.

참고 자료

2020_생물 화학 이론 및 실험노트
Willey, Sherwood, Woolverton, 미생물학 제9판, (주)라이프사이언스, p137~172, p358~371
유주현 외 1명, 응용미생물학실험, 도서출판효일, p211~250
Reece 외 3명, 생명과학 개념과 현상의 이해 7판, Pearson, p186~212
김민주 외 5명, 일반 생물학 실험, 동아대학교 출판부, p135~154
남상욱 외 1명, 유전공학의 이해, 라이프 사이언스, p35~37