전기영동, 형질전환 실험레포트

최초 등록일
2019.08.26
최종 저작일
2018.10
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소개글

A+받았던 레포트입니다
전기영동부터 형질전환까지의 실험과정을 담았습니다

목차

1. Introduction
2. Meterial & Method
3. Result
4. Discussion
5. Reference

본문내용

전기영동이란 전기장에서 이동속도에 따라 분자들을 분리하는 방법 중의 하나이다. 원리에 따라 크게 이동계면 전기영동(Moving boundary electrophoresis), 띠 전기영동(Zone electrophoresis)으로 구분할 수 있다. 이동계면 전기영동법은 분리하고자 하는 분자들이 용액 내에 산재해 있는 상태에서 전류를 통하여 용매와 용액사이 또는 용액과 용액사이에 계면을 이루게 하는 방법이다. 이동계면 전기영동법에서 계면의 이동은 용액에다 빛을 통과시키고 그 결과를 사진으로 만들어서 조사할 수 있다. 이 방법은 이론상 매우 복잡하며 결과를 해석하는데 어려운 점이 많다는 단점이 있다. 띠 전기영동법은 적은 양의 시료용액을 거름종이, 아세트산셀룰로오스 종이, 폴리아크릴아미드 젤, 한천 젤, 녹말 젤 따위의 지지체에 실은 후 전류를 통하게 하여 시료의 성분들이 점 또는 띠를 이루면서 이동하게 하는 방법이다. 전기영동그림을 만들어서 시료에 있는 성분들을 육안으로 확인 할 수 있고, 또한 광도계를 써서 정량할 수 있다. 띠 전기영동법의 경우에는 실험 목적에 따라 적당한 지지체를 선택하여야 분리를 효과적으로 할 수 있다. 지지체로서는 거름종이, 한천 젤, 아세트산셀룰로오스, 녹말 젤, 아크릴아미드 젤, SDS 젤 등이 있는데 본 실험에서는 그 중 가장 흔하고 쉬운 한천 젤(agarose gel)을 이용하여 DNA를 전기영동하였다. 우선 DNA gel전기영동은 전류를 흘러주어 전하를 가진 DNA를 크기에 따라서 분리하는 방법이다. DNA는 backbone의 phosphate group 때문에 전기영동에 사용되는 buffer에서 음전하를 띄고 있으며 두 전극 사이에 위치했을 때 양극 쪽으로 움직이게 되는 기본원리를 지니고 있다. 이때 DNA분자가 gel matrix사이를 통과하는 속도는 분자량이 커질수록 늦어지고 gel matrix가 치밀할수록 늦어지며, 또한 DNA분자량이 같더라도 구조에 따라서 움직이는 속도가 다르다.

참고 자료

Geoffrey M.Cooper, Robert E. Hausman, 『세포학 분자적접근』6판, 2015, 월드사이언스, p.119
http://blog.daum.net/soar7007/7965306
http://blog.naver.com/PostView.nhn?blogId=j1076&logNo=220187921226&parentCategoryNo=&categoryNo=1&viewDate=&isShowPopularPosts=true&from=search
https://blog.naver.com/withcoffee67/70158243055
https://terms.naver.com/entry.nhn?docId=1163380&cid=40942&categoryId=32326
https://m.blog.naver.com/jisung8410/220730360593
http://biochemistry.yonsei.ac.kr/sub/catalog.php?CatNo=13&gene=18
https://ko.wikipedia.org/wiki/%EC%84%B8%EA%B7%A0
https://m.blog.naver.com/PostView.nhn?blogId=j1076&logNo=220617005096&proxyReferer=https%3A%2F%2Fwww.google.co.kr%2F
https://madscientist.wordpress.com/2016/08/02/%EC%95%84%EA%B0%80%EB%A1%9C%EC%8A%A4-%EC%A0%A4%EC%97%90%EC%84%9C-dna%EB%A5%BC-%ED%9A%8C%EC%88%98%ED%95%9C-%EB%82%A8%EC%9E%90/
https://m.blog.naver.com/PostView.nhn?blogId=wldmsqkqn1&logNo=150100608787&proxyReferer=https%3A%2F%2Fwww.google.co.kr%2F
http://biochemistry.yonsei.ac.kr/sub/catalog.php?CatNo=13&gene=18
https://www.slideshare.net/raiuniversity/bsc-micro-i-em-unit-44-culturing-is

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