[영양화학] 간균질액 준비 및 단백질 정량 (A+자료)

소개

[영양화학] 간균질액 준비 및 단백질 정량
A+ 받은 자료입니다.

목차

1.실험목적 및 원리
2.시약 및 준비물
3.실험방법
4.실험결과
5.고찰
6.요약

본문내용

1. 실험목적 및 원리
실험1 목적
조직의 성분 분석에 앞서 간 조직을 균일하게 채취하여 성분 분석에 적당한 농도로 희석하기 위해 실험.

실험2 목적
Lowry법에 의해 서 시료(간 조직)에 포함된 단백질의 양을 정량, 농도를 구하는 실험

① 간
간은 사람의 장기 중에서 가장 크며 그 무게는 1~1.5kg으로서 성인 체중의 약 2.5%에 해당된다. 간은 인체의 대사공장으로 거의 모든 영양소의 대사과정(합성, 분해 및 저장)을 총괄한다. 특히 단백질에 함유된 질소가 유리되어 생성되는 독성이 강한 암모니아를 요소로 전화시키는 해독작용을 수행한다. 간은 포도당을 글리코겐으로 저장할 뿐 아니라 글리코겐을 분해하거나 포도당 신생과정이 이루어지므로 혈당유지에 매우 중요한 장기이다.
간의 기능을 알 수 있는 검사에는 AST와 ALT, 빌리루빈, 알부민, ALP와 gamma glutamyl transferase, 프로트롬빈 시간이 있다.

② 단백질 정량법
- Lowry 법
Lowry법에 의한 단백질 정량에서 생성되는 청색 Cu2+이 펩티드결합과 반응하는데 기인되며 pH10정도에서 포스포몰리브덴산을 함유하는 착화합물 시약(페놀시약, Folin 시약, Lowry 시약, Folin-Ciocalteau 시약)의해 단백질에 있는 방향족 아미노산인 Tyrosine과 Tryptophan 잔기들이 환원되는데도 기인됨. 이 방법으로 10-200의 단백질을 검출할 수 있으며 뷰렛반응보다 감도가 높아 단백질 정량에 널리 사용된다.

-UV 분석법방향족 아미노산인 Phe, Tyr, Trp에 의한 280 nm 에서 최대 흡광을 이용한 방법이다. Phe, Tyr 그리고 Trp같은 Aromatic R groups는 280nm의 자외선을 흡수한다. (그외 amino acid는 자외선 흡수율이 낮다.) 280 nm 에서의 흡광도는 단백질의 농도에 비례한다. 50ug - 1mg 범위의 단백질양의 측정이 가능하다.

참고자료

· 이해하기 쉬운 생화학 실험(2014). 신경옥 외 7명. 파워북. pp.40-55.
· 실험생화학(1997). 한국생화학회. 탐구당. pp.176-206.
· http://www.nics.go.kr/contents/page.do?m=700000494&homepageSeCode=crop_info
· https://www.labome.com/method/Protein-Quantitation.html
· http://blog.naver.com/aesca/10170841485