서강대학교 현대생물학실험3 진핵세포 배양, DNA 손상, 수선. Eukaryotic Cell Incubation, DNA Damage & Repair

목차

1. Abstract
2. Introduction
3. Material and Method
4. Data and Result
5. Discussion
6. Reference

본문내용

본 실험에서 사용한 세포는 HaCaT cell(Human, Adult, low Calcium, High Temperature)로, 이 세포의 origin은 epithelial keratinocyte이다. 조작을 통하여 immortalization되어 양분이 지속적으로 공급된다면 cell division이 계속되는 특성을 갖기에 Cell line으로 사용된다. In vitro 상태에서 분화가 가능하고, 번식한다. Adherent monolayer growing을 하기 때문에 media안의 cell 농도에 성장이 제한되는 suspension cell과 달리 surface area에 의해 생장이 제한된다. 이를 방지하기 위해서는 주기적인 계대배양이 필요하다. 세포의 생장에는 substrate나 liquid, 그리고 물질대사와 에너지를 얻기 위한 영양분이 필요하며, 습도, 온도, 산소, 이산화탄소 농도와 같은 환경적 요소가 뒷받침 되어야 하며, 세포가 오염되어 사멸하지 않도록 Sterility가 중요하다. 이러한 환경을 조성하는 액체를 media라고 한다. 이번 실험에서 사용한 complete media의 조성은 아미노산, 비타민, 무기염분, 포도당, 지질과 지시약으로 이루어지는 DMEM과 세포의 growth factor, adhesion factor, hormone을 제공하는 FBS(Fetal Bovine Serum), 그리고 Sterility를 위한 Penicilin, Streptomycin으로 이루어진다. 이러한 Sterility를 유지하기 위해 세포 배양 과정 중 외부 공기와 노출되어 오염되는 것을 방지하기 위해 Clean bench와 CO2 Incubator를 사용했다. Clean bench안의 공기는 헤파필터에 의해 정화된 공기가 흐르고 있으며 사용하지 않는 경우 UV 등을 이용하여 bench의 안과 바닥을 살균하는 원리이다.

참고자료

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