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[화학생물공정실험]Production of Glucono-D-Lactone from Glucose Using Glucose Oxidase

Production of Glucono-D-Lactone from Glucose Using Glucose Oxidase 산화효소를 이용한 Glucono-D-Lactone 생성에 관한 실험레포트입니다.
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최초등록일 2017.10.22 최종저작일 2017.10
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[화학생물공정실험]Production of Glucono-D-Lactone from Glucose Using Glucose Oxidase
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    소개

    Production of Glucono-D-Lactone from Glucose Using Glucose Oxidase
    산화효소를 이용한 Glucono-D-Lactone 생성에 관한 실험레포트입니다.

    목차

    1. 실험 이론 및 원리
    2. 실험 기구 및 시약
    3. 실험 방법
    4. 주의 사항
    5. 실험 결과
    6. 토의 사항
    7. 참고 문헌

    본문내용

    1. 실험 이론 및 원리
    가. 실험 요약
    Glucose가 Glucose oxidase에 의해서 분해되는 과정을 통해 효소의 활동을 이해하는 실험이었다. 이때, redox indicator와 glucose가 oxidation될 때 1:1의 비율로 발생하는 hydrogen peroxide의 농도를 UV/VIS spectrophotometer를 통해 구할 수 있었다. 이를 통해 효소 반응이 어떻게 일어나는지 간접적으로 알 수 있었다. 결과적으로 본 실험에서는 효소 반응의 mechanism과 효소를 다루는 실험에서 주의해야 할 점들을 알 수 있다. 본 실험을 간략하게 나타내면 다음과 같다.

    <중 략>

    4. 주의 사항
    다양한 시약이 사용되는 실험이므로, 실험에 사용할 시약에 관한 사전 조사를 반드시 수행하여, 각 시약의 안전성 및 다루는 방법 등을 미리 익히도록 한다. 화학 약품을 많이 다루는 실험이므로 보호 장비를 잘 갖추어 실험에 임하도록 한다. 또한, phosphate buffer, GOD solution, POD solution, glucose solution, o-dianisidine solution 등 다양한 용액이 사용되므로, 실험이 끝난 후, 유기폐액 및 무기폐액으로 적절히 분리하여 정리하도록 해야 한다.

    5. 실험 결과
    가. 결과 분석
    용액 내부에 반응이 일어나면 glucose의 양은 감소하고 반대로 hydrogen peroxide의 양은 증가하게 될 것이다. 그러면 증가하게 된 hydrogen peroxide로 인해서 o-dianisidine의 reduction 반응이 일어나게 될 것이다. UV/VIS spectrophotometer는 이 o-dianisidine의reduction form을 측정하게 된다. 보통 benzene 고리는 conjugation 구조로 인해서 UV를 흡수하는 경향이 있다.

    참고자료

    · Lehninger principles of biohemistry; 7th edition; David L. Nelson, Michael M. Cox; W. H. Freeman and company New York, 2017
    · Atkins’ Physical Chemistry 10th Edition, Peter Atkins, Julio de Paula, Oxford Press 2014
    · Perry’s Chemical Engineer’s Handbook, 8th Edition, Robert. H. Perry, McGraw-Hill 2007
    · Biohim Biophys Acta. 1999 Jul 15;1419(2):221-8
    · J Biohem Biophys Methods. 1994 Dec;29(3-4):207-16
    · Am J Clin Pathol. 1976 ℃t;66(4):658-66
    · Clin Chem. 1973 ℃t;19(10):1227-8
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