병리조직학 흰쥐 해부 조직 표본 제작 파라핀 블럭 H&E염색 PAS염색 형광 공초점 현미경

목차

I. Introduction
1. 조직병리학이란?
2. 실험 목적

II. Methods
1. 시료 채취: 흰 쥐 해부를 통한 장기 적출
2. 조직 표본 제작
가. 조직 경화 방법
a. Paraffin block
b. Rozen block
나. Paraffin block 제작 과정
a. 고정 (Fixation)
b. 수세 (Washing)
c. 탈수 (Dehydration)
d. 투명 (Clearing)
e. 파라핀 침투 (Paraffin infiltration)
f. 포매 (Embedding)
g. 박절 (Cutting)
3. 염색 (Stain)
가. Stain이 목적
나. 조직 염색의 원리와 방법
다. Hematoxylin & Eosin staining
a. H&E staining의 원리
b. H&E stain 순서
라. Special Stain - PAS Staining
a. PAS staining의 원리
b. PAS stain 순서
마. Immunofluorescence stain
a. 면역 염색의 특징
b. 면역염색 원리
c. Immunofluorescence stain 순서

III. Results
가. H&E Stain로 염색한 조직 광학현미경 관찰 결과
나. PAS Stain로 염색한 조직 광학현미경 관찰 결과
다. Immunofluorescence Stain로 염색한 조직 관찰 결과
a. 형광현미경
b. 공초점현미경

IV. Discussion

V. Reference

본문내용

I. Introduction

1. 조직병리학이란?
조직병리학이란 병리학의 한 분야로, 병에 걸린 조직, 세포변화를 윤안적, 현미경적, 조직화학적 또는 전자 현미경적 관찰로 건전 조직, 세포와 비교하여 이상을 연구한다. 동시에 감염, 발병의 기구를 ㅎ명하는 학문이다.
일반적으로 기관과 조직은 빛을 투과시키지 못할 정도로 두껍다.
빛이 투과할 수 있는 얇은 조직표본을 현미경으로 관찰하기 전에는 제작하여야 한다.
조직표본은 약 5-10㎛로 얇게 조직을 잘라야하며, 만들어진 표본을 이용하여 병에 걸린 조직, 세포의 생리기능의 변화를 파악할 수 있다.

2. 실험 목적
흰 쥐의 해부를 통한 장기 적출 및 조직 파라핀 절편을 제작한다.
장기 및 조직의 기본적인 구조를 이해하고 파라핀 블록 제작에 관한 지식과 기술을 습득한다.
만들어진 블록을 이용하여 일반염색, 특수염색, 형광염색을 통해 조직병리학적 관점으로 표본을 관찰한다.

II. Methods

1. 시료 채취: 흰 쥐 해부를 통한 장기 적출

● 실험 동물 : 실험용 흰 쥐

● 해부 방법 :
일반적으로는 해부 하루 전에 실험용 흰 쥐를 금식을 시킨 후, 에테르를 적당히 부은 수조안에 넣어두어 마취를 시킨다.
본 실험에서는 마취를 시키지 않은 쥐를 꺼내어 경추파열법을 이용해 핀셋으로 목을 누르고 다른 한손으로 꼬리를 잡고 당겼다.
이후에 생식기 위의 복부를 핀셋으로 잡고 가위를 사용하여 절단한다.
절단 시 사용되는 가위는 한쪽은 뾰족하며, 다른 한쪽은 뭉뚝하게 생겼다.
해부를 할 때에 장기가 파괴되어 관찰이 어려워지기에 항상 뭉뚝한 곳을 안쪽으로 향하게 해야 한다.
흡집을 낸 후에, 흡집을 기준으로 하여 양 옆으로 가죽을 얇은 피부 층으로부터 분리해준다.
그 이후에 얇은 피부 층까지 잘라서 내장을 관찰 할 수 있다.
피부 층을 자를 대에는 혈관을 건들이지 않도록 주의가 필요하다.
간을 지나 횡경막이 나타나며, 횡경막을 양쪽으로 잘라 벌려준다. 호흡계, 소화계, 순환계, 생식계 등을 관찰할 수 있다.

참고자료

· 쥐 해부도 사진 : http://hui429.egloos.com/1107161
· 자궁경부암과 전이 임파절의 파라핀포매 ( Paraffin-Embedded ) 조직에서의 중합효소 연쇄반응 ( Polymerase Chain Reaction ) 을 이용한 HPV의 검색. 송주철. 대한산부인과학회.1991
· 춘계학술대회;파라핀 조직을 이용한 간내 담도암의 유전자 발현 양상 분석. 이경분. 대한간학회. 2007
· Leica Microsystems. Instruction Manual Leica RM2235 V1.3 Nussloch: Leica Microsystem. 2008
· Scientia. Leica Microsystems. Geoffrey Rolls
· http://blog.naver.com/kwanskim/200243460717.
· Streptozotocin 유도 당뇨 흰쥐에서 주요 장부 간 조직학적 변화 비교 연구. 2013. 오태우 외 3명 .동국대학교 한의과대학 본초학교실
· 인체조직학 제2판 정문각
· 해부생리학 메디컬코리아 p403-404
· 신한대학교 실습 보고서 Moodle.shinhan.ac.kr/pluginfile.php/1942/mod_resource/content/
· Michael H. Ross, Wojciech Pawlina(2007), 『조직학』, 이왕재 외 7인(역), 서울 : 군자출판사,
· http://blog.naver.com/kwanskim/20024346071
· http://www.ibric.org/myboard/read.php?Board=bfcont&id=3461